发布时间:2022-03-15 20:42 原文链接: 基因表达系列分析简介

  1995年Velculescu等提出了基因表达系列分析(Serial Analysis of Gene Expression,SAGE)技术,能同时对上千个转录本进行研究。

  SAGE是一种快速分析基因表达信息的技术,它通过快速和详细分析成千上万个表达序列标签(Expressed Sequenced Tags, EST)来寻找出表达丰度不同的SAGE标签序列,从而接近完整地获得基因组表达信息。SAGE技术与基因芯片一起为目前两种最常见的基因表达谱研究方法。随着第三代测序技术的发展,通过构建cDNA文库,然后利用第二代测序技术的高通量优势对mRNA文库进行测序,进而进行基因表达谱分析的方法在基因表达谱研究中占有越来越重要的地位。

  在此方法中,通过限制性酶切可以产生非常短的cDNA(10-14bp)标签,并通过PCR扩增和连接,随后对连接体进行测序。SAGE大大简化和加快了3’端表达序列标签的收集和测序。同DD一样,SAGE是一个“开放”的系统,可以发现新的未知的序列。在进行标本的比较之前,SAGE在cDNA的产生和处理上需要较多个步骤。由于SAGE是一个依赖DNA测序的基因计量方法,它对基因表达的测定比DD更加量化。由于需要进行大量的测序反应,所以费用因素使大多数研究机构对其广泛应用的主要限制。