墨汁吞噬实验

实验原理
　　血液中的中性粒细胞及单核细胞对细菌、异物等具有吞噬作用。在一定量的肝素抗凝血中，加入一定量的墨汁，经37℃温育4小时，涂片染色后，在显微镜下观察吞噬细胞对墨汁的吞噬情况，并计算吞噬率及吞噬指数，从而协助急性白血病的诊断与鉴别。

　　三、实验方法

　　材料：

　　1.肝素抗凝剂配成6U/ml水溶液。

　　2.模式制备普通砚台上加生理盐水5ml，以优质中国块墨或印度墨，以100r/min研磨3min。所得墨汁经普通滤纸过滤3次备用。

　　3.恒温孵育箱、显微镜等。

　　方法：

　　1.取小试管1支，加肝素20μl，加耳垂血或指血100μl于试管中混匀。

　　2.加入过滤墨汁10μl，混匀，加塞。

　　3.置37℃温育4小时，取出，推成血片，待干后，用瑞氏瑞氏镜检。

　　4.计数幼稚细胞或中性成熟粒细胞100个；计数单核细胞20个。计算吞噬率及吞噬指数。

　　四、实验结果计算

　　1.根据细胞吞噬墨粒多少及大小，可定为下列程度：

　　（阴性）细胞内未吞噬墨粒

　　（＋）细胞内含有小墨粒1～5个

　　（＋＋）细胞内含有大小不同墨粒10个左右

　　（＋＋＋）细胞内含有大墨粒10个左右，小墨粒较多

　　（＋＋＋＋）细胞内含有多数大颗墨粒，并有块状、球状，小墨粒很多，但细胞核清楚

　　2.成熟中性粒细胞吞噬率74％±15％，吞噬指数126±60；成熟单核细胞吞噬率95％±5％，吞噬指数313±86。

　　五、注意事项

　　肝素剂量对白细胞的吞噬功能有影响，肝素用量过大，细胞形态异常，吞噬率和吞噬指数降低；肝素用量过小，影响抗凝。肝素用量以每100μl血用0.3单位为好。