发布时间:2020-08-24 10:45 原文链接: 大肠秆菌感受态细胞的制备

实验材料 大肠杆菌

试剂、试剂盒 CaCl2水

仪器、耗材 震荡仪三角瓶试管离心管离心机

实验步骤

1、取1%大肠杆菌E.coli接种于含2 ml LB培养基的试管中,37 ℃振荡培养过夜。

 

2、取0.1ml过夜培养物转种于含10 ml LB培养基的三角瓶中,37 ℃振荡培养3h至OD600=0.3。

 

3、然后把培养物倒入1.5 ml离心管中,冰浴10min。

 

4、在4 ℃下以4000 rpm离心5min,去上清液。

 

5、把菌体悬浮于15 ml冰冷的0.1M CaCl2溶液中,置冰上30min

 

6、然后再在4 ℃下以4000 rpm离心10min,去上清液。

 

7、将菌体悬浮于0.1 ml CaCl2溶液中,冰浴放置4-12hr备用。