大鼠肌肝（Cr）酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
药品名称：
通用名：大鼠肌肝（Cr）酶联免疫分析试剂盒
使用目的：
本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中肌肝（Cr）含量。
实验原理
本试剂盒应用间接法测定标本中大鼠肌肝（Cr）水平。用纯化的大鼠肌肝（Cr）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的肌肝（Cr）标准品和未知浓度的肌肝（Cr）待检样品，温育后，加入生物素标记的抗IgG抗体，再与链霉亲和素-HRP结合，形成免疫复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肌肝（Cr）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠肌肝（Cr）浓度。
试剂盒组成
1 | 20倍浓缩洗涤液 | 50ml×1瓶 | 9 | 标准品S1（48μmol/L） | 0.5ml×1瓶 |
2 | 链霉亲和素-HRP | 6ml×1瓶 | 标准品S2（32μmol/L） | 0.5ml×1瓶 | |
3 | 酶标包被板 | 12孔×8条 | 标准品S3（16μmol/L） | 0.5ml×1瓶 | |
4 | 生物素标记的抗-IgG抗体 | 6ml×1瓶 | 标准品S4（8μmol/L） | 0.5ml×1瓶 | |
5 | 显色剂A液 | 6ml×1瓶 | 标准品S5（4μmol/L） | 0.5ml×1瓶 | |
6 | 显色剂B液 | 6ml×1/瓶 | 10 | 密封袋 | 1个 |
7 | 终止液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 3张 |
8 | 样品稀释液 | 6ml×1瓶 | 12 | 说明书 | 1份 |
标本要求
1．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
2．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
操作步骤
1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品，其余各步操作相同）、标准品孔、待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品50μl，在样本反应孔中先加入待测样品10μl再加入样品稀释液40μl（样品最终稀释度为5倍），盖上封板膜，轻轻振荡混匀，37℃温育45分钟。
3. 配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
4.