使用流式细胞仪进行细胞分选通常包括以下步骤:
样品制备:
将待分选的细胞样品制备成单细胞悬液,调整细胞浓度至合适范围。
仪器校准和设置:
启动流式细胞仪,进行液流系统的校准,确保液流稳定。
根据要分选的细胞特性,设置合适的激光波长、荧光通道、散射光参数等。
染色标记:
如果需要,使用特异性的荧光标记抗体或染料对细胞进行标记,以便区分不同类型的细胞。
建立分选策略:
在分析模式下,先对样品进行检测,根据细胞的散射光和荧光信号特征,确定目标细胞群和非目标细胞群的界限。
设置分选条件,如根据荧光强度、细胞大小等参数来定义要分选的细胞群体。
分选操作:
切换到分选模式,设置分选出口和收集容器。
启动分选程序,流式细胞仪会根据设定的条件将目标细胞分选到指定的收集容器中。
收集和处理:
分选后的细胞收集在适当的容器中,根据需要进行后续的培养、分析或其他处理。
质量控制:
分选结束后,可对少量分选后的细胞进行再次检测,以评估分选的纯度和效率。
需要注意的是,不同型号的流式细胞仪在操作细节上可能会有所差异,因此在进行细胞分选前,应仔细阅读仪器的操作手册,并根据具体的实验需求进行优化和调整。同时,为了保证分选效果和细胞活性,操作过程中要注意保持细胞的良好状态和无菌环境。
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