不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长情况也比较好。这种一般是归于生长速度慢的细胞。比方内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞情况会生长的比较好,比方巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度十分得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞情况会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。假设长成相连在一起的一满片的时分,细胞形状基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是欠好的。所以在养细胞的时分应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。
关于有些人总是会遇到养的细胞形状怎样都欠好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。关于贴壁细胞,假设细胞形状欠好,(或许细胞形状不明晰,表面似有异物等)可以在传代的时分进行如下操作:
首要,倒掉旧的培养基,参与 3 ml 新的培养基(有无血清的都可)洗刷一次,用滴管吸走,然后再参与 3 ml 的培养基,进行预吹打,操控吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。
其次,把吹打下来的细胞悬液参与到新的培养瓶内,培养瓶事前参与培养基,放入培养箱内培养,按时刻点查询细胞贴壁情况。10 分钟查询一次,20 分钟,30 分钟查询一次。选择一个时刻点,已经有部分细胞贴壁的情况下,从头置于洁净台,底面朝上灵敏倒出其间的培养基,参与 3 ml 新培养基再轻轻洗一次。然后参与完全培养基培养。后续查询细胞生长情况以及形状。
假设一次效果还不抱负,可重复屡次。直到找到细胞形状。其间要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时分再传。反之亦然。
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