引物设计软件都可以给出Tm,与引物长度、碱基组成及所使用缓冲夜的离子强度有关。
长度为25base以下的引物,Tm计算公式为:Tm = 4℃(G + C)+ 2℃(A + T)
对于更长的寡聚核苷酸,Tm计算公式为:
Tm = 81.5 + 16.6 x Log10[Na+] + 0.41 (GC%) – 600/size*
*公式中,Size =引物长度。
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1、质粒DNA提取提取质粒的时候,最后一步的酒精挥发很关键,基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间,最好是空调吹热风,或是37度温箱放长一点的时间,我试过室温过夜,酶切很好......
各种类型的软件都详细列出:1.三维分子类 22.DNA分析 33.RNA分析 34.蛋白质分析 45.生化教学 46.生化工程 47.序列格......