发布时间:2024-07-16 14:37 原文链接: 如何评估不同荧光标记的稳定性?

评估不同荧光标记稳定性的方法:


  1. 时间序列检测:将标记好的细胞或样本在特定条件下(如室温、4°C 或 37°C 等)放置不同的时间间隔,然后在相同的检测条件下使用流式细胞仪或荧光显微镜进行荧光强度的检测。观察随着时间的推移,荧光强度的变化情况。

  2. 光照暴露实验:将标记后的样本暴露在一定强度的激发光下不同的时间,然后检测荧光强度的变化,以模拟在实际检测过程中的光照影响。

  3. 温度循环测试:对标记的样本进行反复的温度变化处理,然后检测荧光强度,观察温度变化对荧光标记稳定性的影响。

  4. 化学环境影响评估:将标记后的样本置于不同的 pH 值、离子强度或存在某些化学物质的溶液中,一段时间后检测荧光强度。

  5. 存储稳定性测试:将标记好的样本在不同的存储条件(如温度、湿度、有无保护剂等)下保存一定时间,然后检测荧光强度。

  6. 对比已知稳定的荧光标记:使用一种已知具有良好稳定性的荧光标记作为对照,与待评估的荧光标记在相同条件下处理和检测,比较它们荧光强度的变化情况。

  7. 多轮检测:对同一批标记的样本进行多次重复检测,观察荧光强度是否存在明显的衰减。

  8. 定量分析:通过建立荧光强度与标记分子浓度的标准曲线,在不同条件处理后,测量荧光强度的变化,并换算为标记分子的损失量,从而定量评估稳定性。


通过以上多种方法的综合应用,可以较为全面地评估不同荧光标记的稳定性。


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