发布时间:2019-07-11 21:34 原文链接: 如何选择流式细胞仪(2)

⑼、检测细胞内因子(TH1/TH2细胞检测)

未活化的淋巴细胞所分泌的细胞因子极少,用流式细胞仪很难检测出来。因此,在检测前需刺激活化。活化所用的刺激素为PMA佛波酯+Ionomycin。淋巴细胞在刺激素的作用下活化,分泌细胞因子到细胞外。因流式细胞仪只能对细胞表面或内部的抗原进行检测,如细胞因子分泌到细胞外则检测不到。因此必须阻止细胞因子的分泌。抑制细胞因子分泌的试剂为Brefedlin A或Monensin。Th1/Th2细胞首先是CD4+T细胞。因此存在着用CD4来设定细胞群的问题。我们知道CD4不但在T细胞上表达,还在所有的单核细胞上表达。因此单独用CD4设门无法将CD4+T细胞区分开来。那么我们用CD3和CD4双参数设门是否可以呢?回答是否定的。因为在佛波酯的刺激作用下CD4 抗原的表达会迅速下调,甚至完全丧失。所以不适合于设门。用CD3和CD8设门,因CD8不受佛波脂的影响且绝大多数D3+CD8的细胞都是CD3+CD4+细胞,因此可用CD3+CD8-细胞群来确定CD4+T细胞群。FITC标记CD8,PE标记IL-4和,PE-CY5标记IFN-r,APC或PE-CY7标记CD3。

流式细胞仪要求:488nm或633nm(仅限APC染料)光源,525nm、575nm、675nm,767nm滤光片

⑽、细胞增殖状态检测

核增殖抗PCNA、Ki67、BrdUrd用于衡量细胞增殖分裂状况,在评估肿瘤预后有重要意义。为些标志物的检测一般同细胞表面标志物同时检测。FITC标记PCNA或Ki67或BrdUrd,PE或(并)PE-CY5标记细胞表面标志物。

流式细胞仪要求:488nm或633nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片

⑾、染色体分析

流式细胞仪染色分析运用两种特异性染料:Hoechest33258与核苷酸AT结合;Chromomycin A3与GC相结合。从而在双参数坐标上根据染色体ATCG含量的不同识别各种染色体。平时进行的染色体分析耗时且需要操作者极具经验,而用流式细胞仪时可快速地识别出异常染色体,如加配分选系统可将这些异常染色体分选出来作进一步分析。本文来自检验地带网

流式细胞仪要求:360nm或488nm光源,450nm、580nm滤光片

⑿、BrdUrd标记追踪细胞分化 copyright labdd.com

通过细胞分化时涉入溴化尿嘧啶,再使用抗BrdUrd抗体及PI核酸染料可精确识别它们。在流式细胞仪上可清楚地识别出处于G1、S、G2、M期的细胞,在肿瘤研究中有着重要作用。

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片

⒀、淋巴细胞亚群分析

外周血CD3、CD4、CD8、CD19、NK等各类淋巴细胞亚群定量分析。

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片,液量绝对计数系统www.labdd.com

⒁、白血病免疫分型

CD45设门三色白血病免疫分型。

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。

⒂、血小板分析

血小板活化实验、血小板功能分析。血小板识别抗体及相应活化指标。

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量绝对计数系统

⒃、白血病、淋巴瘤微小残留病灶检测

根据初诊免疫分型结果,多参数联合设门检测是否有残留白血病细胞,监测白血病的复发。

T系白血病微小残留病灶检测 本文来自检验地带网

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片,液量绝对计数系统

B系白血病微小残留病灶检测,液量绝对计数系统 copyright labdd.com

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。

髓系白血病微小残留病灶检测,液量绝对计数系统

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。最少三色荧光,参数越多检测越为灵敏。

⒄、细胞凋亡分析 检验地带网

DNA凋亡峰检测、ANNEXIN-V/PI双染法凋亡检测。

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm滤光片

⒅、肿瘤耐药分析

P-gp、LRP、MRP、BCRP各类耐药蛋白表达及功能检测。

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片

⒆、强直性脊柱炎诊断

检测淋巴细胞B27表达强度及百分比,诊断强直性脊柱炎。

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片

⒇、PNH诊断

外周血或骨髓检测淋巴细胞、粒细胞、红细胞或单核细胞CD55、CD59表达强度或百分比,确诊夜间阵发性血红蛋白尿。

流式细胞仪要求:488nm光源,525nm、575nm、675nm滤光片。


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