如何通过2D细胞培养工作流程进行3D细胞培养？

细胞培养是药物研发、组织工程、毒理学测试、干细胞研究以及基础研究中的重要工具。在临床前的药物研发过程中，单层细胞培养仍然占主导地位。然而，2D培养只能在有限程度上模拟组织生理条件，而体内细胞实际上是在三维网络中相互作用 的。因此，2D培养产生的结果往往在预测临床有效性和毒性方面作用有限，导致药物研发过程中的高损耗率。3D细胞培养使细胞外基质（ECM）组分得以表达，同时能够形成细胞-细胞、细胞- 基质之间的相互作用。这些特征对于复制体内细胞的分化、增殖和体外功能是非常重要的。球状体培养被认为是预测性体外筛选实验的改进方法，其对于临床前药物研发具有高度生理相关性，尤其是在癌症研究和毒理研究中。

同样，在进行磁性3D细胞培养时，也必须避免将细胞粘附到培养容器的表面。Greiner Bio-OneCELLSTAR®细胞培养产品具有细胞排斥表面，可完美匹配磁性3D细胞培养。细胞排斥的表面特性是通过对容器表面进行创新的化学修饰来实现的。所有具有细胞排斥表面的细胞培养容器都通过辐射（SAL为10-3）进行灭 菌，不存在可检测的内毒素、DNase/RNase和人源DNA，也无细胞毒性作用。细胞毒性的评估是根据EN ISO 10993-5文件用哺乳动物细胞系进行的。与所有Greiner Bio-One微孔板一样，细胞排斥表面的微孔板的制造尺寸符合美国国家标准协会（ANSI 1-2004）的建议，以保证与所有通用型实验室设备的兼容性。总之，Greiner Bio-One细胞排斥表面的细胞培养产品为培养半贴壁和贴壁细胞系、悬浮培养、干细胞聚集以及球状体的形成提供了理想的平台。

在球状体培养中，细胞在具有细胞异质性、 营养和氧气梯度的三维系统中生长，以更接近体内肿瘤微环境。球体培养和2D单层培养（例如肿瘤细胞系）相比，会有显著的功能差异，包括蛋白质表达的改变、磷酸化模式和对抑制剂的响应。Greiner Bio-One开发了具有细胞排斥表面的CELLSTAR®细胞培养产品，用于3D培养。细胞排斥表面有效地防止细胞贴壁，从而可以促进三维球体的自发形成：圆底微孔板每个孔中的单个球状体或平底板中的多个球状体。对于高放大倍率下单个球状体的 显微镜分析等应用，Greiner Bio-One还提供磁性3D细胞培养技术，能够满足高通量筛选对理想光学 特性的需求。 两种产品线均可以使您使用快速简便的2D工作流程实现3D培养！

与能够增强细胞贴壁的标准组织培养表面相反，细胞排斥表面能有效地防止细胞贴壁。对于半贴壁和贴壁细胞系的悬浮培养，常规的标准疏水表面不足以胜任，而具有细胞排斥表面的CELLSTAR® 细胞培养容器可有效地防止细胞贴壁。自组装的球形簇可用作3D细胞培养的模型，对于球状体的形成，细胞-细胞间相互作用必须*于细胞和培养表面之间的相互作用。干细胞聚集体的形成也是如 此，这是多种干细胞培养和分化方案中的关键步骤。Greiner Bio-One的细胞排斥表面培养容器为培 养球状体和干细胞聚集体提供了理想的平台。在水凝胶中进行长期培养是一种常用的模拟3D环境的方法。当使用常规的组织培养容器进行该方法时，一些细胞倾向于从水凝胶中迁移出来，在容器表面形成2D亚群。对这种细胞群体的分析将导致数据混合有来自2D和3D细胞培养物的信息。具有细胞排斥表面的CELLSTAR®细胞培养容器可用于水凝胶培养， 因为这种表面能有效地抑制2D亚群培养物的形成。