定氮仪对黑豆营养物质的提取与分析

　　黑豆系被子植物，豆科，一年生作物。种皮为黑色的大豆称为黑豆。大豆原产中国，种质资源丰富，全国共搜集保存大豆22000 多份，其中黑豆2980 份，占全部大豆种质资源的13.2%[1,2,3]。黑豆在全国各地都有栽培，尤以山西、河北、陕西栽培最多。民间老百姓主要将黑豆作为饲料来喂养牲畜，认为人食用后不易消化，在山西北部用来加工豆腐等。

　　大豆生长过程中除了形成高蛋白质、高脂肪外，还能形成一类次生代谢物异黄酮，它在抗癌方面具有重要作用。实验还证明异黄酮可杀死儿童B 细胞先兆白血病和成人急性白血病的所有细胞[4,5,6,7]。但目前对黑豆的营养价值、营养成分以及开发利用的研究工作很少有报道。近年来，在日本黑豆的系列产品开发很多[8,9]，已经成为中老年人预防与功能食品的一种重要选择。在我国，随着研究工作的深入，黑豆将会成为一种高级功能食品。

　　2.试验方法

　　2.1 供试材料、试剂与仪器及计算方法

　　2.1.1 原料：黑豆为山西省离石、平遥、长治、静乐、河曲与神池等地采集六个品种，对比分析所用为离石本地品种

　　2.1.2 试剂：无水乙醇、乙醚、四氯化碳均为分析纯；硫酸（比重1，84）、硒粉（催化剂）、甲基红+溴甲酚绿（染色剂）、芦丁、薯蓣皂标准品。

　　2.1.3 仪器：JJ—2 型组织捣碎机、DF—101 集热式恒温加热磁力搅拌器、DLSB—5/40 型低温冷却液循环泵、RE—52AA 旋转蒸发器、SHB—ⅢA 循环水式多用真空泵、UV—1200 紫外可见分光光度计、S2F—06A 型脂肪测定仪、 D2F--#型真空干燥箱、TD18 电子分析天平、 KDN-04A全自动定氮仪、7230G 可见分光光度计。

　　2.1.4 计算方法：

　　（1）薯蓣皂、芦丁的计算方法：

　　提取率（%）=（测量值×稀释倍数×定容量/样品重）×100

　　粗含量（%）Cx=（AxCs/As）×100

　　Cx 为样品的浓度（mg/mL） Cs 为标准溶液的浓度（mg/mL）

　　Ax 为样品的吸光度（Abs） As 为标准溶液的吸光度（Abs）

　　（2）粗蛋白的计算方法：

　　粗蛋白含量（%）=（V-Vo）×0.014×A×100/W

　　V—消耗氯化氢的毫升数 V0—空白实验时消耗氯化氢的毫升数

　　N—氯化氢的当量浓度 0.014—1ml 氯化氢的克当量数

　　A—固定系数 W—样品重量

　　（3）粗脂肪的计算方法：

　　准确称取 抽取 虹吸 烘干 称重所得

　　（4）总糖测定的计算方法：

　　含糖量（%）=c×10-6×1000/m=c/m

　　2.2 实验方法和过程：

　　将黑豆捣碎、烘干、研磨成粉末，用TD18 电子分析天平称量一定量的粉末样品。

　　2.2.1 薯蓣皂、芦丁的测定：

　　准确称取各样品一式三份，用65%的乙醇浸泡24 小时，然后用旋转蒸馏的方法进行浓缩、烘干干燥，析出深黄色的芦丁和白色的薯蓣皂药膏；用65%的乙醇稀释、过滤、定容至5ml 容量瓶中。将定容后的溶液取5ml 稀释定容至50ml 容量瓶,以65%乙醇溶液作参比,用紫外可见分光光度计测得其吸光度并进行计算。

　　2.2.2 蛋白质测定

　　将样品过筛， 准确称取各地样品一式三份 加入少许硒粉与10 毫升硫酸，在消化炉中进行消化40 分钟 然后在定氮仪中进行蒸馏（具体操作略），最后用0.1 摩尔的氯化氢滴定，记录滴定所用氯化氢毫升数，按照公式计算蛋白质含量。

　　3 结论

　　随着定氮仪对对黑豆品种的进一步研究、这将对黑豆粗加工、深加工提供了科学的依据；为将来黑豆系列的食品与功能食品的研究与开发指明了方向。