| 实验方法原理 | 将 4~8 只新生鼠的小脑切成小立方块，放入 HBSS，在 37°C 条件下用胰蛋白酶消化 15 min。将细胞接种于涂有 L-多聚赖氨酸的培养皿或培养瓶。 |
|---|---|
| 实验材料 | DMEM HBSS L-多聚赖氨酸 阿糖胞苷 0.025% 胰蛋白酶 硅酮 |
| 仪器、耗材 | P e tr i培养皿 解剖刀 解剖剪 解剖镊 Pasteur吸管 10ml吸管 试管 水浴箱 |
| 实验步骤 | 1. 在无菌条件下切除小脑，放入 HBSS（含有 3 g/L BSA）。 2. 用解剖刀将脑组织切成约 0.5 mm3 大小的立方体。 3. 将组织块移入 12 ml 试管，用 HBSS 洗 3 次。每次洗涤后让组织块沉到试管底部。 4. 加入 10 ml 用 HBSS 配制的 0.025 % 胰蛋白酶（用 HBSS 配制），在 37°C 条件下用水浴箱孵育 15 min。 5. 将胰蛋白酶消化的脑组织移入 50 ml 离心管，然后加入 20 ml 生长培养液，以终止胰蛋白酶的消化作用。 6. 通过用硅化的 Pasteur 吸管研磨使组织分散，直至获得单细胞悬液。 硅化 Pasteur 吸管： (a)用超纯水将硅酮液稀释为 0.1%~1%； (b)将吸管浸人硅酮液或用硅酮液冲洗吸管内面； (c)放置 24 h 晾干或在 100°C 条件下放置几分钟使吸管变干； (d)将吸管干热灭菌。 用 L-多聚赖氨酸处理培养皿： (a)用超纯水溶解 L-多聚赖氨酸（10 mg/L）； (b)将混合物过滤除菌； (c)每个 35 mm Petri 培养皿内加入 1 ml L-多聚赖氨酸液； (d)10~15 min 后吸出 L-多聚赖氨酸液，加入 1~15 ml 培养液； (e)将培养皿在培养箱内放置 2 h 以上，至细胞接种。 7. 将盛有细胞悬液的离心管放 3~5 min，让小的组织团块沉到试管底。然后，用 Pasteur 吸管吸出组织团块。 8. 将单细胞悬液离心（200 g ，5 min ) 后，吸出上清液。 9. 用生长培养液混悬细胞团，然后接种细胞，每个培养皿的细胞密度为 2.5×106~3.0×106 个。 10. 培养 2~4 d 后（两天后最佳），加入 5~10 μmol/L 阿糖胞苷，继续培养 24 h。 11. 用 DMEM （含有 30 mmol/L 葡萄糖、2 mmol/L 谷氨酰胺、24.5 mmol/L 氯化钾、100 mU/L 胰岛素（Sigma，Ⅰ-1882）、7 μmol/L 对氨基苯甲酸（Sigma，A -3659）、100 μg/ml 庆大霉素和 10 % 加热灭活的 FCS）换液。 |
8月20日，第33届全国中学生生物学奥林匹克竞赛在广州闭幕。来自30个省区市代表队的577名队员参赛，共产生金牌获得者150名，银牌260名，铜牌167名。据了解，该竞赛总分前50名同学，将进入国家集......
数学高手与中专生的强烈反差，让姜萍近日成为了舆论场的“网红”。公众在关注她所取得的成绩之余，也在不断追问：未来像姜萍这样的“偏才”和“怪才”应该何去何从？ “建议我国对拔尖人才的......
5月20日，中南大学与西湖大学签订合作框架协议。本着“优势互补、资源共享、合作共赢”的原则，双方将围绕共同感兴趣的领域开展跨校、跨学科科研合作。签约仪式现场。中南大学供图其中，中南大学湘雅医学院与西湖......
党的二十大报告提出“坚持教育优先发展、科技自立自强、人才引领驱动，加快建设教育强国、科技强国、人才强国”。实现人才引领驱动的关键是战略科技人才。战略科技人才站在国际科技前沿、引领科技自主创新、承担国家......
为贯彻实施《国家标准化发展纲要》和《国家“十四五”期间人才发展规划》，培养标准化人才队伍，近日，国家标准委、教育部、科技部、人力资源社会保障部、全国工商联五部门联合印发《标准化人才培养专项行动计划（2......
近日，中共中央办公厅、国务院办公厅印发了《关于进一步加强青年科技人才培养和使用的若干措施》（以下简称《若干措施》），明确提出包括提高国家自然科学基金对青年科技人才的资助规模，将资助项目数占比保持在45......
建设国家战略人才力量是支撑我国高水平科技自立自强的重中之重。党的二十大报告对加快建设国家战略人才力量作出部署，提出努力培养造就更多大师、战略科学家、一流科技领军人才和创新团队、青年科技人才、卓越工程师......
聆听院士和知名教授讲座报告，参观费林加诺贝尔奖科学家联合研究中心、上海化工研究院等机构，进入华东理工大学（以下简称华理）生物采油实验室科研轮转，负责“航天育种菌种及代谢产物分析”大学生创新创业项目训练......
作为支撑我国高水平科技自立自强的关键力量，战略科学家站在国际科技前沿、引领科技自主创新、承担国家战略科技任务，也是近年来我国人才培养和使用的重点。然而，当前我国能跻身国际前沿、参与国际竞争的战略科学家......
作为支撑我国高水平科技自立自强的关键力量，战略科学家站在国际科技前沿、引领科技自主创新、承担国家战略科技任务，也是近年来我国人才培养和使用的重点。然而，当前我国能跻身国际前沿、参与国际竞争的战略科学家......