小鼠神经干细胞分化为神经元

实验概要

小鼠神经干细胞分化为神经元

主要试剂

无菌水、DPBS、0.05%胰蛋白酶胰蛋白酶、细胞基础培养液、 PDL、laminin、小鼠神经分化培养液（Neuron M）

主要设备

4孔板、12mm细胞培养玻片

实验步骤

① 在4孔板每个孔中放置一块12mm细胞培养玻片，每孔加入100ug/mL的PDL500μL，室温静置过夜。
② 吸去PDL，用无菌水冲洗玻片，室温静置晾干；每孔加入10ug/mL的laminin500μL，37℃、5%CO2静置过夜。
③ 将小鼠神经干细胞以0.05%的胰蛋白酶消化2 min，以等体积的10%FBS终止，1000 rpm离心5 min，弃上清并用Neuron M重悬细胞，以细胞密度为1×10⁴个/ml接种于弃除laminin的四孔板。
④ 每隔2天半量更换Neuron M，到第21天时，分化完成，可在镜下观察到神经元细胞与神经丝。