带你了解流式细胞仪检测

　　什么是流式细胞仪？

　　 流式细胞仪（Flowcytometry）是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节分辨率为零。随着流式细胞技术水平的不断提高，其应用范围也日益广泛。目前，流式细胞分析已普遍应用于免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等临床医学和基础医学领域。

　　流式工作原理？

　　 流式可以做这么多，让我们看看它是如何工作的，流式细胞仪的作用在于，对细胞进行自动分析和分选，其重要的表现形式就是“颜色”。首先让液体悬浮液中的细胞以单个细胞的形式快速通过不同波长的聚焦激光束。细胞瞬间通过激光束，同时发出散射光，如果结合了荧光结合抗体，就从荧光中发出光。光通过一个复杂的过滤器、镜子和探测器的组合来检测荧光信号，收集光信号并转化为数字信息。计算机对这些数据进行分析，我们便能得到每个单独的细胞相应参数的表征。从而了解了细胞的功能和特点。

　　流式细胞仪分类

　　1、分析型流式细胞仪

　　 用于快速分析检测细胞组分及颗粒悬液，通过同时检测分析液流中细胞上多种信号，对细胞加以细致的区分鉴别，临床检验主要使用此类流式细胞仪，例如BriCyte E6、Calibur、Canto、FC500、Navios、NovoCyte等系列，均已拿到CFDA注册证。此外还有CyFlow、CytoFLEX、Gallios、Guava、LSR、MACSQuant等各类配置的科研型流式细胞仪。

　　2、分选型流式细胞仪

　　 用于快速分离获取目的细胞，在分析检测基础上，通过分选模块对细胞加以分离。电荷式分选是目前主流的分选方式，具有分选效率、纯度高，不易污染等特点，例如Aria、InFlux、MoFlo Astrios EQ、MoFlo XDP、S3等流式分选仪。

　　3、全自动式流式细胞仪

　　 根据临床常规检验的需求，临床型流式细胞仪向着更自动化的操作流程和更好的生物安全性能发展。为了进一步简化临床操作，全自动式流式细胞仪具有自动样本加样、溶血、检测，检测结果通过双向LIS自动上报等类似血细胞分析仪的全自动化功能，即人工放入血样管，无需下一步人工干预，仪器就能得到结果，大大提高了实验室的工作效率和管理效率，减少可能的人为错误。如Aquios CL、AutoCyte等全自动流式细胞仪。

　　4、图像型流式细胞仪

　　 将流式多色检测技术和荧光显微镜图像显示技术相结合的一种流式细胞仪，通过荧光信号的强度以及荧光图像对细胞亚群进行定性和定量分析。如ImageStream系列成像流式细胞仪。

　　流式细胞仪在中国发展历程

　　 流式细胞仪主要应用于淋巴细胞亚群分析及绝对计数、HLA-B27的检测（强制性脊柱炎）以及血液病/淋巴瘤的免疫分型。除了中心实验室及检验科以外，应用的临床科室主要集中在血液科、肿瘤科等。此外，疾控系统也应用于HIV监测。

　　 流式细胞仪全球市场规模约23亿美元，国内市场规模约12亿元，其中科研领域和临床领域各占一半左右，目前仍处于仪器导入期。除了中心实验室及检验科以外，应用的临床科室主要集中在血液科、肿瘤科等。此外，疾控系统也应用于HIV监测。

　　国内主要研发生产企业包括BD、BCI、杭州艾森、博奥新景（博奥生物子公司）、迈瑞、旷博生物、上海透景等。

　　 我国流式细胞仪临床用户主要为2155 所三级医院及部分二级医院，此外，我国2500 多所大学和科研机构、各体检中心和独立医学实验室，也都是流式细胞仪的客户群体。目前我国的流式细胞仪数量还很少，市场需求远未饱和。

　　 如今流式细胞术已经日臻完善，随着光电技术、计算机技术进一步发展，流式细胞仪已开始向模块化、经济型发展，即它的光学系统、检测器单元和电子系统更加集成化，并可按照实验要求进行灵活的调整和更换。此外，临床型的流式细胞仪还追求更加自动化的操作。包括自动化的样本处理及与LIS的双向通讯等。现在，流式细胞术已成为免疫学、细胞生物学和临床医学等领域中的重要工具。