干式生化分析仪的临床应用体会

生化分析是临床诊断常用的重要手段之一，根据样品与试剂发生化学反应是否为固相化学反应，可以将生化分析分为湿化学式（普通）和干化学式生化分析。随着临床对急诊生化检验结果在报告时间上越来越高的要求以及临床生化检验技术的快速发展,急诊生化检验技术逐渐从传统的湿化学向干式生化发展。

1 干化学和湿化学的测定原理

干化学，采用多层薄膜的固相试剂技术，只要把液体样品直接加到已固化于特殊结构的试剂载体，即干式化的试剂中，以样品中的水为溶剂，将固化在载体上的试剂溶解后，再与样品中的待测成分进行化学反应，从而进行分析测定。湿化学，即普通的化学反应，则在反应容器中加入液态试剂和样品，混合后发生的化学反应。干化学只是相对于湿化学而言，它实际上也是在潮湿条件下进行的化学反应。

2 干式生化分析仪和普通湿式生化分析仪的结构异同

生化分析仪中存在多种化学分析技术，其中包括显色反应、ISE（离子选择性电极）、免疫比浊等。其中显色反应发生的方式和容器，则是干式生化分析仪和普通湿式生化分析仪最主要的不同点。与此相应的，两种生化分析仪的光路系统也有所不同。

普通湿式生化分析仪一般在比色杯或流动池中发生显色反应，通常在采用比色杯的仪器还配有搅拌器，以保证充分快速的反应。因此，普通湿式生化必须配有管路系统，实现样品吸取、样品稀释、试剂分配等功能，流动池式生化分析仪的管路系统还需要实现管路清洗和排出废液等功能。此外，普通湿式生化分析仪通常采用光电比色法进行分析，其吸光度与被测溶液浓度满足朗伯-比尔定律。

干式生化分析仪则完全抛弃了传统的管路系统，使用干试剂条作为固相试剂。干试剂条一般由多层薄膜组成。例如V350干式生化分析仪所使用的干试剂条为三层：第一层为分布扩散层；能使标本均匀分布，能过滤大分子，将溶血、高血脂血及胆红素干扰减至最低，同时还提供反射测定的背景；第二层为试剂层：包含干性试剂，控制反应顺序；第三层为指示剂层：包含染料以产生显色复合物。多层薄膜技术不仅能掩盖待测物的有色物质并提供背景、选择性地阻留或去除干扰物质；而且还将等同于湿化学法反应原理的各种物质分层中进行，某一层中的反应产物又可进入另一层中进行其它反应，从而引导反应序列；其各层可以给出一种特定的环境用以控制反应序列和反应时间。样品中的待测组分浓度可以通过Kubelka-Munk 理论来进行计算。

3 干式生化分析仪和普通湿式生化分析仪各自的操作维护方式

普通湿式生化分析仪每次使用时，需检查试剂，试剂量不足时需及时添加，而且，试剂本身也有有效期，放置时间过长也需及时更换。但普通湿式生化分析仪适用于大批量测试，每次检测几百几千个样品，在这种使用状况下，使用方便。

由于普通湿式生化分析仪内部含有管路系统，为了防止管路堵塞、漏水、漏气等现象的发生，日常的维护保养工作尤为重要。每日开机前需检查各清洗液、蒸馏水、稀释液等是否足够，检查管路系统是否有漏水现象；开机后需检查各试剂是否需要添加，机器冲洗管路，并作零点校准；关机时需冲洗机器管路，倒空废液桶，清洗加样针及搅拌器。定期用专用清洗液冲洗管路系统、加样针、搅拌器等部件，定期作光路检查。其他的维护保养工作，可以根据实际工作需要进行，如清洗空气过滤网、使用专用清洗液浸泡冲洗管路系统，更换液路中的过滤器、更换密封垫等。

如果普通湿式生化分析仪因某种原因而长期闲置，在放置期间最好能够每周定期开机冲洗管路系统2~3次，以防止管路堵塞；否则，则需要在放置以前用蒸馏水反复冲洗管路，然后将管路中的水排尽，待管路中的水彻底晾干以后，才能装箱保存。

干式生化分析仪使用时不需配制试剂，而是使用厂家已经配置好的干试剂条。由于干式生化分析仪本身不存放试剂、不做管路清洗，因此，在使用中就显得简单快捷的多。只需要将液体样品加到干试剂条上，样品就能够渗透过层层薄膜，经过显色反应后显示出相应的颜色，从而可以计算出样品中待测组分的浓度。

干式生化分析仪由于已经抛弃了管路系统，结构较为简单，因此其保养维护工作也简单了很多。一般来说，只需要定期做光路检查，根据需要做机器内部清洁即可。

如果干式生化分析仪长期不用，需长时间放置，它不需要像普通湿式生化分析仪那样经常开机冲洗，只需要注意保存环境的防尘、防湿、防高温等条件就行了。但两种机器在长时间放置后需投入使用时，必须先进行质控测试，质控正常的才可以投入使用；不正常的则必须进行校准，校准后，质控正常的才可以正常使用。

4 干式生化分析仪和普通湿式生化分析仪的测试结果比对

根据已有的研究，两种方法所有分析项目的R （相关系数）均大于0.93，相关性检验P<0.05。统计结果表明两种仪器的分析结果相关性良好。两种方法均能满足临床检验的需要。

5 干式生化分析仪和普通湿式生化分析仪的质量控制与结果校准

生化分析仪在长期使用过程中必须经常进行质量控制检查，质控正常的才可以投入使用；质控不正常的则必须进行校准，校准后，质控正常的才可以正常使用。

两种生化分析仪可以利用厂家提供的质控品和校准品进行质量控制或进行校准。但在实际工作中，由于干式生化分析仪的质控品价格较高并且不能反复冻溶，因此，可以利用正常人血清在普通湿式生化分析仪上检测定值后，再到干式生化分析仪上进行质控检查。

6 临床应用体会

VITROS350是美国强生公司推出的用于急诊生化的全自动分析系统之一。它采用独特的多层膜干化学技术,能满足临床快速、准确和灵活的要求,通过我们的临床应用,有以下体会。

6.1 智能化故障指示

（1）　环境报警　VITROS350对温度、湿度、干燥度要求较高,当温度或湿度超过范围,仪器会自动报警提示用户及时更换干燥剂或保湿剂。换下的干燥剂或保湿剂可烘烤好反复使用(干燥剂100度密封烘烤8h,在南方保湿剂可60度密封烘烤6h)。

（2）　吸样报警　VITROS350可以通过压力传感器对样本的凝块、气泡进行探测,还可以自动进行液面感应、短缺标本的探测,检测到符合条件的标本才能进行正常测试。若标本中有凝块、气泡或标本放错位子,仪器感应不到液面就会自动报警,提示用户对样本重新进行处理或检查是否放错位置。

（3）　样本吸头报警　如果吸头架上无吸头或者吸头不合格,仪器会在ACTION里报警,这里可以打开仪器,拿出起头架,加上吸头或拿掉不合格的吸头,盖上仪器盖子,点击初始化键即可恢复正常运行。

（4）　试剂干片被卡　如未及时清理废干片盒,导致废干片盒内干片过多而使正常使用过的干片无法正常被丢弃,这时仪器会报警,处理办法:如果卡的干片量少就从废干片盒上方将卡住的干片轻轻掏出;若被卡住的干片比较多就需要打开比色盘,将废干片取出,然后点击初始化键即可恢复正常运行。

6.2 实际工作中的发现

（1）TBIL与BU、BC 结果的不一致　

由于干化学法不同于湿化学测定TBIL与DBIL在计算得出IBIL。而干化学则是分别测定TBIL、BU、BC的值,因此其测定结果会有一定误差。

（2）CK、CKMB结果倒置