发布时间:2019-05-18 17:54 原文链接: 应用激酶交换反应的末端标记

应用激酶交换反应的末端标记

1.在置冰浴中的1.5ml微量离心管内依次加入:

50 pmol合成寡核苷酸

2.5μl 10×反应缓冲液

1.5μl ADP300μmol/L终浓度)

10μγ-[32P]ATP33pmol

1.5μl T4多核苷酸激酶(15U

蒸馏水加至25μl

2.37℃水浴温育30分钟。

3.加入2μl 0.5mol/L EDTA或加热至68 10min终止反应。混合液经Sephadex G-25自旋转,离心(2000×g4min),去除未掺入的核苷酸。用液闪计数计数1μl柱洗脱液。