徕卡生物显微透射

徕卡生物显微镜电镑分辨率定义为电镜可分辨样品上两点（或两线）zui小距离。这是表示电镜性能的一个重要指标。

徕卡生物显微镜让我们先来讨论点分辨率。在散射吸收成像机制中，影响点分辨率的主要是电镜各级透镜的像差，它们使物样上的每个几何点都变成了有——定半径的像斑。由*章已知，当物样的尺寸（f）逐级放大时，它所对应的电子束有效孔径角（。）却远级缩小。所以物镜处的有效孔径角、zui大，物样尺寸r。zui小。从像差的成因得知，在几种有重要影响的像差中，物镜的球差和衍射差zui为重要，成为决定透射电镜点分辨率的两个因素。

徕卡生物显微镜在分辨率公式中习惯采用球差的zui小模糊圆表达式。又因为分辨率讨论的是对物样上的可分辨细节，所以对像差我们都采用它们在物方空间中的相应公式。球差用差同时存在时所形成的模糊因半径。随着分辨率减小，*项球差也减小，但第二项衍射差却将加大。因此必然能找到一个折衷的zui佳切镜孔径角qp，它使zui终的df值zui小。此zui小值（小）mm就是电镜的理论分辨串极限6Ih。数学运算得出与此相应的理论分辨率极限为不同学者在计算电子轨迹时作了一些不同假设率公式赂有不同，但主要差别只在前面的常系曾对特定的透镜场和电子发射的角分布进行了计算。

徕卡生物显微镜在相位衬度的成像理论中，典型的方法是从单原子像出发，针对zui佳相位条件来推算点分辨率。zui佳相位条件离不开球差（G）与离焦量（d／）的zui优组合以及zui佳韧镜孔径角，表明两种理论定出的点分辨率理论值是一致的。

在徕卡生物显微镜的高分辨率的领域中，测定点分辨串是极精细的工作。稍有闪失就会引起很大的误差。近年来采用一种光学衍射图的方法来代替直接测量细节的间距。将一张拍摄到的高分辨保（即其底片）放入光学衍射仪中转换成一幅衍射图。从衍射图上离中心zui远的清晰的衍射点，可推算出它所代表的样品上的zui小细节，也就是分辨率极限。图2—11（a）是测定点分辨率的照片。样品出碳膜上喷金微粒制成。图中除其高分辨显微像外，还有用光学衍射仪得出的衍射图（左下角）。衍射固定出的电镜点分辨率，促使数字图像处理工作的开展。

上述光学衍射仪的功能可以用计算机来替代，具体说是用快速富里叶变换（F盯）来得到衍射图．并直接从荧光屏上测定点分辨率。这样，徕卡生物显微镜目前对高分辨率电镜的点分辨率测定已很方便和准确。

徕卡生物显微镜在近代电镜的性能指标中，除点分辨率外往往还有一个线（或品格一Lan％e）分辨率值。这是研究晶体样品时有用的分辨率标准。通常它的数值小于点分辨值。例如PhiliPs公司EM430电镜的点分辨率为o．2nm，而线分辨率为o．14nm。因为二者是从术同条件下确定比的，而且从实测角度来看，品格条纹的衬度常优于点间衬度，因此更容易分辨。图像是在JEM一200cx电镜上拍摄的金单品条纹像，其今zui小条纹间距o．14nm就是其线分辨率。