微流控电阻抗技术检测蜜蜂孢子

倘若地球上的蜜蜂消失了，人类或要消失？这句话不是小编说的，是下图这个老头儿说的。小编也绝没有要危言耸听的意思。

这个老头儿在他的绝密手记上是这么说的：人类有可能在2060年灭绝；倘若地球上的蜜蜂全部消失了，人类或许也要消失了，甚至有可能只剩下不到4年的时间。

好吧，说什么我都不相信他说的2060年人类就灭绝的事情。不过认真地说，如果没有蜜蜂授粉，地球上的万物应该都会受到影响吧。难道要靠苍蝇么？

内生孢子又称芽孢，主要来源于寄生在昆虫的消化道上皮细胞中的微孢子虫，典型的有蜜蜂肠道微孢子虫和家蚕微孢子虫。微孢子虫病感染传播速度快，易出现群体体质衰弱甚至死亡，因此需要对昆虫肠道中的内生孢子进行检测，以达到对微孢子虫病的防控和判断最佳治疗期。

目前，实验室对于蜜蜂肠道内生孢子的计数只能通过显微镜计数，其过程费时费力，且蜜蜂肠道内生孢子粒径较小，仅2_~3μm，不同人员间镜检结果偏差较大，且浓度偏高时镜检尤其困难。卓微科技定制版JIMBIO CL 细胞计数仪可替代显微镜镜检，检测浓度范围为1e5~5e6，能够提高计数效率，给出准确客观的计数结果。

下面是整个蜜蜂肠道内生孢子的计数案例

材料：

感染微孢子虫病蜜蜂 、PBS（1X）

孢子悬液纯化制备：

1、取蜜蜂的腹部，置于放入蒸馏水及研磨粉的研钵中研磨。

2、研磨均匀后转入10ml离心管中，500rpm低速离心3min。

3、上清转入新的10ml离心管，弃沉淀，2000rpm高速离心10min。

4、弃上清，用清水重新悬浮沉淀，4000rpm离心10min。

5、取沉淀，用1mlPBS溶解沉淀，4℃保存备用。

显微镜镜检图：

结果与分析：

从图1、图2可以看出，蜜蜂肠道内生孢子比较小，且浓度较高的时候，样本平铺在血球计数板上非常密集，显微镜下计数困难。

从表1中可以看出，定制版JIMBIO-CL测试结果与计数板统计相比，平均浓度基本一致，由于定制版JIMBIO-CL为10微升样本全计数，测试结果波动较小，稳定性明显优于进口血球计数板。

注意事项：

1、只能使用PBS（1X）稀释待测蜜蜂孢子样本；

2、加样前需充分混匀待测样本（可根据样本总量选择不同规格液枪吹打）；

3、为保证检测结果的稳定性，待检测样本总量不要低于100微升。