微流控芯片在基因分析中的应用

　　1、高聚物基PCR微流控芯片

　　PCR作为一种体外扩增核酸的方法，早已是研究分子生物学的不可缺少的工具。虽然传统的PCR操简单，但是它加热循环缓慢且效率低，这主要是因为其加热体积太大。为了解决这个问题，PCR的反应体积被减少到5oul甚至于1pl，但是体积的减少相应的也限制了产量。PCR微流控芯片就是在这种情况下发展起来的。

　　与传统的PCR相比，PCR芯片的主要优势在其比表面积大，传热速率快，大大提高了反应速度;而且内部温度均匀，反应过程易于控制。同时PCR芯片反应所需的样品和试剂量少，大大降低成本。如KOPP利用PCR微流控芯片在1.5-18.7min的时间内，经过20次循环完成了淋球菌促旋酶基因176bp片段的PCR扩增。

　　2、核酸限制性酶切片段的分离分析

　　微流控芯片可用于迅速分离DNA限制片段PCR产物，比常规的毛细管电泳分离要快得多。自从Manz等成功的应用微流控芯片毛细管电泳技术分离了寡核苷酸混合物。微流控芯片分离的DNA片段的长度在逐步扩大，同时出现了可进行平行分析的多通道阵列芯片。

　　3、DNA测序

　　用微流控芯片四色标记法测序，可在540S分离150个碱基，准确率在97%以上。常规DNA测序需要制备微升级的样品，试剂消耗量大，有报道将纳升级的样品制备系统微缩到芯片上进行测序，可在分离前除去多余的引物、盐分、核苷酸等，所用测序体积是Sanger双脱氧终止法的1/300，测序成本明显降低，而且可进行固相测序。