微生物实验室日常工作规范！

一、微生物检测意识

树立正确的无菌观念和检测人员的素质，是每一个微生物检测人员应具备的素质，好的修养素质和积极的工作态度是保证结果准确的基础，下面的规定规范都是为检测服务的，如果检测人员没有好的素质，这些规定都是虚设，摆设；希望下面的规范是每位检测人员想要做得，而不是强加在自己身上的紧箍咒。

①增强自己得生物安全意识，如何保护自己，如何保护样品，如何无菌操作，有责任心。

②实验原理，实验原理是实验的精髓，掌握它，就能够对整个实验更好的了解深入，学习研究。

③实验条件的把握，对实验的每个条件是否掌握清楚，实验的关键控制点是否清楚。

④实验结果的把握，一个实验结果的出现，首先应该自我分析，并且具备这种分析能力，对异常如何处理或是进一步验证。

⑤具备研究好学心态，检测工作是一个相对只是含量较高的职业，高科技飞速发展的今天，许多当时的先进技术不久就陈旧落后，检测工作也一样，优秀的化验员总是虚心好学，善于研究，总是处在科技的前沿。

⑥人员素质，积极向上，乐于助人，对工作负责，工作第一等，努力提高自己的工作质量。

二、微生物检测

1.实验前的准备

1.1无菌间

无菌间是微生物实验的重要环节，关系到实验结果的准确性，无菌间的使用规范要严格要求，保证实验环境影响因素降到最低。

使用要求：

1、无菌间在使用前，必须先进行清理、臭氧杀菌时间50min或紫外灯杀菌30min。

2、检测使用的器皿、样品等物品的进出，通过缓冲窗进行传递，使用完毕后紫外灯杀菌30min，开传递窗时禁止两边同时打开。

3、检测人员进入缓冲间后，先更换拖鞋、佩带无菌帽和一次性口罩，更换衣服，并将其摆放整齐，方可进入无菌间。

4、进入无菌室过程中，依次打开和关闭各缓冲间的门，以避免空气流通带入外界的杂菌。

5、无菌操作前必须使用75%酒精对手部进行消毒，接种有害菌种时必须戴手套。

6、进行接种所用的吸管，平皿及培养基等必须经严格消毒灭菌，打开包装未使用完的器皿，不能放置后再使用，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼后使用，剪刀、镊子至少每周进行一次高压灭菌。

7、从包装中取出吸管时，吸管尖部不能触及外露部位，使用吸管接种于试管或平皿时，吸管尖不得触及试管或平皿边。

8、接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，接种细菌或样品时，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。

9、接种环或针在接种细菌前应经火焰烧灼全部金属丝，必要时还要烧到环和针与杆的连接处，接种结核菌和烈性菌的接种环应在沸水中煮沸5min，再经火焰烧灼。

10、吸管吸取菌液或样品时，应用相应的橡皮头吸取，不得直接用口吸。

11、检验结束后，所有带菌的培养基、试剂、稀释液和器皿必须尽快清理出无菌间灭菌洗刷。

12、检验结束后，人员离开无菌间前，须将无菌间的卫生彻底清理、并用紫外灯进行杀菌。

13、无菌间所用工器具（剪刀、镊子、胶头、涂抹棒、托盘盒等）使用完毕后，摆放整齐。

14、灭菌后的无菌间悬挂“已灭菌”标识，正在使用的无菌间要悬挂“使用中”标识。防止检测人员在未经过灭菌的无菌间中进行微生物检测。

其它注意事项：

1.  禁止在无菌间内打手机，由于业务需要可在缓冲间内打手机。

2.  实验过程中穿着整齐，不要出现露头发、鼻孔等现象，禁止在无菌间打闹、喧哗。

3.  实验过程中，物品要摆放整齐，实验产生的垃圾要单独存放不要乱放，防止污染实验样品。

4.  紫外灯每周五打扫卫生时要用酒精棉球擦拭，防止灰尘阻挡影响杀菌效果。

1.2实验器具

实验器具是微生物实验的一个关键控制点，实验器具的无菌是保证实验结果准确的重要因素。

①培养皿，首先应确认是否经过消毒，确认后进行外观检查，观察是否有破损，有破损处废弃。灭过菌的平皿最多保存一周时间。打开的平皿整齐的摆放到实验台上备用，发现有破裂的平皿应废弃；使用时看是否有平皿内部存有杂质、培养基等异物也应立即废弃。

②玻璃器皿，新购置玻璃器具因含有游离碱，应在清洁液或2%盐酸内浸泡24小时，再用蒸馏水清洗。检验沾染的油迹、污浊物等器具可用10%NaOH浸泡1小时后，用清水冲洗干净。每周洗刷盛生理盐水的三角瓶子，防止水垢太厚影响灭菌和微生物生长。

③实验完毕后，使用的实验器具应立即清洗消毒，防止微生物增长污染或者伤害到人员。所有卫生用具如拖把、扫帚、抹布、垃圾桶等都要根据污染区、清洁区、无菌区要求严格区分开、并专用，不得相互混淆，卫生用具每周定量用1：20次氯酸钠液消毒浸泡、清洗、凉干，以免污染。

④在进行各种检验时，应避免污染；遇有场地、工作服等污染时，应立即处理，防止细菌扩散以免造成污染。凡吸过菌液的吸管或滴管或染菌的培养皿，应立即放入盛有消毒液的容器内或高压灭菌处理。工作人员必须每天坚持做好环境卫生工作，防止灰尘飞扬，定期对整个操作环境进行消毒。

1.3药品的使用

微生物药品是微生物实验的一个关键控制点，培养基质量的关系到检测结果准确的重要因素。

①药品的采购，实验药品缺少时，由药品管理员上计划。微生物药品常规药品按“箱”进行计算，不常用药品按“瓶”进行计算，生化鉴定管按“支”进行计算，每种保留至少1个单位库存量。

②药品取用，药品取用时到药品管理员取钥匙，取用后将药品柜锁死，并将钥匙归还给药品管理员。取用人员发现药品低于1个单位库量时，及时通知药品管理员。