微生物絮凝剂发酵罐灭菌的一般操作步骤:
灭菌前准备
清洁发酵罐
用清水冲洗罐体内部,去除上次发酵或残留的物料、污垢等。
对于一些顽固污渍可使用专用的清洁剂进行清洁。
安装和检查
正确安装搅拌桨、温度传感器、pH 电极(如果有内置)、溶氧电极(如果有)等内部构件,并检查是否能正常工作和是否安装到位、密封良好等。
检查各阀门(蒸汽阀、空气阀、进料阀、出料阀、取样阀等)确保关闭紧密无泄漏,处于正确的初始位置。
连接好蒸汽输送管道等外部管路系统。
准备相关物品
准备好保护帽(如果电极等部件在灭菌时需要保护)。
准备好记录灭菌过程的相关表格和工具(如温度压力记录仪等,如果有)。
开始灭菌(通常采用湿热灭菌法)
空消(罐体灭菌)
缓慢打开蒸汽发生器(如果有单独的设备)或外部蒸汽阀门,使蒸汽缓慢进入发酵罐夹套(如果有)预热,同时打开夹套上的排气阀,排尽冷凝水和冷空气,当罐壁温度上升到接近灭菌温度(如80 - 90℃ )。
关闭夹套蒸汽,打开罐体直接进蒸汽的阀门,让蒸汽从罐体底部或顶部的蒸汽入口等进入罐体内部。
打开罐体上的排气阀(但不能全开,维持一定压力),排出冷空气和冷凝水,当罐内温度上升到121 - 125℃(压力0.10 - 0.15MPa左右 )。
保持温度和压力持续20 - 30分钟(根据具体发酵罐大小和要求灭菌彻底程度等适当调整)。
实消(连物料一起灭菌,如果此时已经加入物料)
如果是先空消后加入物料,那么物料加入后进行以下步骤:
关闭所有无关阀门,打开蒸汽进入管道阀门,蒸汽通过进料口、取样口等进入物料。
开启搅拌(如果物料允许搅拌),使物料均匀受热,升温至121℃左右。
保持罐内压力在0.1 - 0.12 MPa左右,持续灭菌20 - 30分钟左右。
灭菌后操作
关闭蒸汽阀门,停止供汽。
当罐内压力自然下降到接近0.05 MPa(注意不能形成负压,以免损坏罐体和管道)时,可缓慢引入无菌空气(如果有空气过滤器,应确保过滤器已经过灭菌且处于无菌状态),一方面保持罐内正压,另一方面排出残余蒸汽和冷凝水。
对罐体温度、压力等参数持续监测一段时间,确保系统稳定和安全。
待罐体冷却到合适温度(如接种温度等),准备进行后续的接种等操作。
注意事项:
在整个灭菌过程中,要密切关注温度和压力的变化,做好记录,防止出现异常波动。
确保蒸汽的质量和压力稳定,蒸汽中不能含有过多的冷凝水。
对连接的管道、过滤器等附属设备也应确保灭菌到位。
灭菌结束后打开罐体等操作时要注意做好人员防护,防止烫伤等。
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