德国香兰素制备工艺介绍

2003年德国Muenster大学Overhage, Joerg等人以重组的大肠杆菌E. coli XL1-Blue(pSKvaomPcalAmcalB)将丁子香酚转化成阿魏酸，30-L规模生物转化，总发酵30小时后，阿魏酸的最大浓度为14.7 g/L，摩尔产率93.3%（以丁子香酚计）。然后加入大肠杆菌E. coli(pSKechE/Hfcs)，使阿魏酸转化成香兰素(J. Overhage, H. Priefert, and A. Steinbuechel, Appl. Environ. Microbiol. 65:4837-4847, 1999)，香兰素产率为0.3 g/L。

2000年德国Muenster大学Achterholt, S.等人对无枝酸菌HR 167的基因进行了研究，这个菌株含有烯酰CoA水解酶/醛缩酶(ech)，和feruloyl-CoA合成酶(fcs)。将这个基因片断放在 4000bp PstI片断(P40)上。再在大肠杆菌中表达。结果发现重组后的大肠杆菌降解阿魏酸的途径与萤光假单孢杆菌AN 103和假单孢杆菌HR199相似。这说明无枝酸菌HR 167也具有将阿魏酸转化成香兰素的特性。无枝酸菌HR 167的代谢途径如下：阿魏酸→阿魏酰→CoA→4-羟基，3-甲氧基丙酶-CoA→香兰素→香兰酸。

1999年德国哈尔曼及赖默股份有限公司申请的中国专利CN99812907.0揭示了一种转化的和/或诱变的单细胞或多细胞生物，其特征在于丁子香酚和/或阿魏酸分解代谢的酶被灭活，使得中间产物松柏醇，松柏醛，阿魏酸，香草醛和/或香草酸积累。

1996年德国哈尔曼及赖默股份有限公司申请的美国专利US6133003利用土壤丝菌DSM 9992菌株将阿魏酸转化成香兰素，32小时后，产量达11.5g/L，理论转化率为77.8％。