发布时间:2020-09-01 12:03 原文链接: 心血管系统药理实验中的选择与应用(四)

(四)抗心肌缺氧缺血药

  脑垂体后叶素能使冠状动脉痉挛,造成急性心肌供血不足;加以外周阻力增加,导致心脏负荷加重,在心电图上可见到心肌缺血变化。药物若能防治这种心肌缺血变化,被认为可能有抗心肌缺血的价值。此法记录的心电图具有心肌缺血的特异性。常选用家兔,从耳缘静脉注射脑垂体后叶素2.5μ/kg(用生理盐水稀释为3ml),时间30秒。由于静脉推注引起的心肌缺血心电图变化急剧,不便判断药物,可改用静脉滴注法,即在10分钟时恒速滴入上述量的脑垂体后叶素。因家兔心电图变化持续时间较长,心电图记录持续到15~30分钟。静滴可持续更久。滴注后家兔心电图可现出T波先升高缓低平、双相、倒置,ST段抬高,心率变慢,P-R及Q-T间期延长,还偶有窦性心律失常、室性早搏、室性心动过速等心律失常变化。

  异丙肾上腺素为强的β受体兴奋药,能通过加快心率增强心肌收缩力等环节增加心肌耗氧量,造成心脏负荷过重,心肌微循环障碍,连续应用可形成心肌梗塞样变化,用心电图和病理切片可检测病变程序。常选用豚鼠、家兔或狗,豚鼠和狗每天皮下注射异丙肾上腺素2~8mg/kg,家兔10~16mg/kg,连续两天。可见心电图T波由正变负或双相,并伴有ST段抬高;窦性心动过速,早搏或其它心律失常。豚鼠心脏病理变化有:白细胞和巨噬细胞浸润,心肌纤维肿胀、断裂、横纹消失,甚至溶解,发生玻璃样变和脂肪变性等。

  结扎豚鼠、家兔、猫、狗、猴、猪等动物在左冠状动脉前支均可引起心肌梗塞。其中选用家兔和狗最多且效果明显。

  心肺灌流是分析药物对心脏作用的经典方法。一般用狗或猫,但用小动物有其优点,研究强心甙心可采用豚鼠;而研究心肌耐缺氧,则宜选用大白鼠。在大白鼠心肺灌流标本上,可研究心肌耐缺氧能力,还可同时分析心输出量、血压、心率等因素与心肌耐缺氧能力的关系。常选用雄性、体重250~300克左右大白鼠为宜。体重过小或过大,影响耐缺氧时间。大白鼠心肺灌流,最麻烦是出现肺水肿,影响心脏存活时间及实验结果。减轻心脏前负荷可以缓和肺水肿的产生。

  饶曼人等报导在白鼠对强心甙的作用虽较猫敏感性低671倍,但研究一般药物对心脏收缩力、心输出量、静脉压的影响,较狗、猫心肺制备节省大量人力、物力。采用大白鼠心肺灌流法用以研究心肌耐缺氧能力,较小白鼠在密闭容器内观察常压或减压时的死亡时间,能更准确地代表心脏耐缺氧能力,而且能测定药物对心输出量、血压、心率、心收缩力等功能的影响,有利于分析药物延长耐缺氧时间的影响因素。但实验条件、技术操作都有一定要求,动物用量及工作量也较大,作为筛选药欠简便,作为分析抗心绞痛药物的作用原理,则较为合适。

  强心甙生物检定,常选用健康体重260~380克家鸽、1.5~4公斤猫、200~600克豚鼠和体重相差不超过7%的蛙作实验。

  (五)血管阻力测定

  器官或局部血管恒速灌流泵法:根据血管阻力(R)与灌流压(P)成正比,与流量(Q)成反比的原理,可以用各种流量计测定血流量,并且同步记录动脉血压(即灌注压),用上述原理即可推算出血管阻力,常选用体重12公斤以上的狗作实验,可采用内颈动脉灌流法、椎动脉灌流法、后肢血管灌流法、肾动脉灌流法等测定血管阻力。还可选用体重250克以上的大白鼠,采用后肢及肾动脉灌流法来测定血管阻力。大白鼠腹主动脉与下腔静脉紧贴在一起,分离腹主动脉时,不要弄破下静脉造成出血;插入腹主动脉灌流用的塑料管位置要适当,以保持后肢灌流通畅,如有扭曲,血管阻力急剧升高,造成人为误差。塑料插近可拉成葫芦形,以便结扎固定于腹主动脉内;为使血压稳定,可输注适量6%小分子右旋糖酐。大白鼠血压和血管阻力对药物反应敏感,且大白鼠消耗药量少,又节约人力,最适合于筛选新药和研究心血管药理。但大白鼠血压和阻力记录有时不及狗稳定,对某些药物反应的特异性及动物种属的差异还有待积累资料。

  药物对血管的作用,除了在整体动物身上观察分析其作用外,还可在离体情况下进行。其原理都是使动物的器官与身体血液循环隔断联系,人工地用适当的溶液(如洛氏液)从动脉近心端灌入,并以一定压力使灌流液经组织毛细血管至静脉流出,以维持器官的生理功能,从灌流液的流量可反应该器官的血管阻力变化情况。常选用兔耳、下肢、肝、肾、肠系膜血管灌流。带神经离体兔耳血管灌流法用于分析舒约缩血管的作用部位。药物注射于躯体或另一兔耳,如能增加或减少带神经的兔耳灌流量,说明是间接作用,如药物直接注入带神经的兔耳上才发生反应,则是直接作用。离体兔耳血管灌流法用以观察分析舒缩血管药物对兔耳血管的直接作用。离体兔耳血管因无中枢控制,血管张力降低,对收缩血管药敏感;对扩张血管药敏感性稍低,灌流压应根据流量酌情调节。

  大白鼠离体膈肢交叉灌流法,从甲鼠的颈动脉引出血液,灌注到受血动物乙鼠的离体后肢,通过接受器和泵使灌注血回到甲鼠颈静脉。在该制备中,利用乙离离体后肢只保留神经与其它部分联系,故药物只能通过神经影响后肢;而给予甲鼠的药物,则只通过血流来影响所灌注的后肢血管;以此来观察分析药物是直接作用还是通过神经起作用。还可采用大白鼠离体后肢灌流法和大白鼠离体后肢自身灌流法进行实验。大白鼠肾脏灌流实验法可用于研究肾血管阻力等血液动力学变化及肾脏重吸收、分泌等生理生化功能。