液相色谱柱通常在选择保护柱之前首先要考虑样品是否清洁,对于大部分分析工作来说,一支25px长的保护柱便能够提供充分的保护作用。但是,如果样品较脏,或工作中发现经常要更换25px的保护柱,那么就应该选用50px或75px的保护柱。保护柱越长自然所装的色谱填料就越多,则其保护性能越好,当然随着保护柱长度的增加,样品的保留时间也相应增加。一般来说,保护柱的内径与分析色谱柱的内径相同或者相当即可。
保护柱的填充方式也很重要,目前有薄膜装填法,填装过程简单方便,而且可以在实验室中进行干装。但是,其大的缺点是不经济,特别是针对中国的具体情况,一次性使用相对费用较高。另外,薄膜装填法的保护柱所装填的色谱填料有限,只能提供很有限的保护作用;不过也因为所装填的色谱填料较少,保护柱的长度较短,所以对分析样品的保留时间的影响也很小。
保护柱结构其实就是缩短的分析柱,设计方式上有直接式/手紧式或整体式。整体式设计是由色谱柱的生产厂商直接安装在分析柱上,必须与分析柱一同订货,可以非常方便的使用,但不能改动。直接式结构设计可以在任何时候由色谱工作者来安装连接,可以与任何品牌的色谱柱连接使用,而且可以根据不同的样品选择合适的保护柱长度。手紧式保护柱从结构上讲是与直连式保护柱医药,只是在连接时不用借助扳手等工具,直接用手上紧即可。另外从保护柱结构的角度看,保护柱又分为是否可以更换保护柱的柱芯,现在大多数的保护柱均可以更换柱芯,可以降低保护柱的使用成本。
大多数色谱工作者是根据分析柱的填料来选择保护柱的填料,正常情况下可以选择与分析柱一样的色谱填料。但是,根据实际的分析工作,可不必与分析色谱柱的填料完全匹配。
选择保护柱的原则是:在满足分离分析要求的前提条件下,尽可能的选择较短的保护柱,尽可能选择对分离样品保留弱的填料。
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