恶性肿瘤的发生、发展与机体免疫系统密切相关。运用流式细胞术的方法，检测T淋巴细胞表面抗原（CD₃、CD₄、CD₈），B淋巴细胞表面抗原（CD₁₉、CD₂₀），NK细胞表面抗原（CD₁₆₊₅₆）在恶性肿瘤病人外周血中的表达，并检测活化T、B、NK淋巴细胞的免疫指标（CD₃/HLA-DR、CD₃/CD₂₅）的变化，探讨淋巴细胞在肿瘤中的表达状况及其意义，并进一步分析恶性肿瘤病人免疫治疗前后的免疫功能改变，以致使我们更深一层认识肿瘤在细胞水平的免疫功能。

1、资料与方法

1.1  研究对象  2003年8月～2004年5月本院肿瘤科病房50例恶性肿瘤病人，均经病理确诊，其中肺癌23例，肝癌6例，乳癌4例，胃癌5例，胰腺癌2例，淋巴瘤4例，结肠癌3例，鼻咽癌1例，肾癌2例。男28例，女22例，年龄29～65岁，平均57岁。其中10例（肺癌6例，淋巴瘤4例）年龄29～53岁，平均41岁，经免疫增强剂（高聚生4ml静滴，每日1次，共3个月；白介素Ⅱ30万U皮下注射，每周2次，共3个月）治疗一疗程（3个月）后，复查一次。

对照组31例为健康体检者，男18例，女13例，年龄36～50岁，平均43岁，其中年龄和性别构成比与病人组差异无显著性（P＞0.05）。

1.2  材料与仪器  小鼠抗人单克隆抗体CD₄/CD₈/CD₃、CD₁₉、CD₂₀、CD₃/CD₁₆₊₅₆、CD₃/HLA-DR、CD₃/CD₂₅及同型对照、红细胞裂解液（Optilyse C）均为法国Immunotech公司出品。流式细胞仪（Epics XL·MCL）是美国BECKMAN  COULTER公司生产。

1.3  研究方法  使用直接免疫荧光标记全血溶血法，流式细胞仪测定肿瘤病人外周血淋巴细胞表面抗原表达。
　　1.3.1  淋巴细胞表面标记  取荧光标记单克隆抗体CD₄/CD₈/CD₃、CD₃/CD₁₆₊₅₆、CD₃/HLA-DR、CD₃/CD₂₅、CD₁₉、CD₂₀各10μl放入试管中，分别加入外周全血100μl，室温避光孵育15min。并作同型对照。
　　1.3.2  溶血  加入Optilyse C500μl，混匀，室温避光10min。
　　1.3.3  洗涤  离心（1500r/min）5min，弃去上清液，加入PBS液1ml，混匀。重复洗涤1次。
　　1.3.4  重悬  加入1ml PBS，混匀，制成单细胞悬液。
　　1.3.5  检测  上机，每个样品检测5000个以上细胞，用FCM软件分析，计算淋巴细胞中各标记细胞的百分率。最后所有数据应用SPSS进行统计学处理。

2、结果

对50例恶性肿瘤病人与31例健康体检者进行外周血淋巴细胞表面抗原FCM检测，做统计学分析，结果见表1。

注：与对照组相比，* P<0.01，** P<0.05