有关物质照高效液相色谱法(通则0512)
测定供试品溶液取本品适量(约相当于戊四硝酯25mg),置25ml量瓶中,加甲醇20ml,超声15分钟,使戊四硝酯溶解,用流动相稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相定量稀释制成每1ml中约含戊四硝酯61g的溶液。系统适用性贮备液取硝酸甘油对照品溶液适量(相当于硝酸甘油20mg),置25ml量瓶中,加甲醇20m超声15分钟,用流动相稀释至刻度,摇匀系统适用性溶液精密量取系统适用性贮备液与供试品溶液各1ml,置100m量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。
色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇水(54:46)(用磷酸调节pH值至3.0)为流动相;检测波长为30nm;进样体积20pl系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,戊四硝酯峰的保留时间约为12分钟,戊四硝酯峰和硝酸甘油峰的分离度应大于2.0,理论板数按戊四硝酯峰计算不低于3000测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注入液相色谱仪,记录色谱图至戊四硝酯峰保留时间的3倍。
限度供试品溶液色谱图中如有杂质峰,除相对保留时间0.35之前的色谱峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.3%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液的主峰面积(0.6%)。