射电镜制备注意事项(细胞)
1、细胞数量: > 1*10的6次方;
2、消化细胞时要注意不要过度,及时用含血清的培养液终止消化;
3、终止消化后,预冷的PBS (pH 7.4 )洗细胞1-2次离心(1500rpm, 5min)弃上清(细胞收集在1.5ml的EP管中) ;
4、加入1mL 2.5%戊二醛溶液(需用PBS配制该溶液),可用吸管轻轻吹散细胞,使细胞悬浮于固定液中;
5、4度固定过夜后寄出 (寄送时加冰袋,并用2.5%戊二醛溶液将EP管中剩余空间充满)。
肾脏组织样本制备步骤:
1、迅速取材;2、PBS漂洗2次,切成小块(米粒大小);3、快速放入2.5%戊二醛固定液中,4度固定过夜;4、固定液将整个容器里面的空间都充满,封口膜封口;5、多加冰袋运输。
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