抗氨苄青霉素大肠杆菌的分离、培养及计数

 接下来喆图小编就来说说抗氨苄青霉素大肠杆菌如何进行分离、培养和计数及实验所需材料和药品 ：

  待分离的大肠杆菌菌液、高压蒸汽灭菌锅、LB固体培养基、LB液体培养基、接种环、玻璃三角刮刀、培养皿、恒温培养箱、摇床、超净工作台、酒精灯、9ml无菌水、移液枪

  1、实验需要制备并使用选择培养基：选择培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率。

   2、分离单克隆菌落采用平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面，在数次划线后培养，可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体，即菌落。  

   3、使用LB液体培养基并放置在恒温培养箱中培养单克隆菌落以达到扩大培养的目的。  

   4、稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液（10^5,10^6,10^7）分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落。  

    5、用无菌水稀释菌液：取一毫升液体培养基基液加入一瓶含有9ml 的无菌水中，放入恒温振荡器中震荡使液体充分扩散。取震荡后溶液中的1ml液体加入另一瓶无菌水中，震荡，重复此步操作，进行梯度稀释，每一步浓度稀释到之前的十分之一。

     6、计数时，选择未污染的培养基计数。使用记号笔在培养基表面标记，并使用计数器计数菌落个数。