测量时,抗体先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗体反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。