抚生试剂其它免疫荧光细胞化学染色方法

   本法应用直接法或间接法的原理和步骤，可对活细胞在试管内进行染色，常用于T细胞和B细胞、细胞培养物、瘤细胞抗原和受体等的检查和研究，阳性荧光主要在细胞膜上。膜抗原荧光抗体检测法(FACS)即采用此原理。
 
    双重染色法
    在同一标本上有两个抗原需要同时显示(如A抗原和B抗原)，A抗原的抗体用FITC标记，B抗原的抗体用RB200标记，可采用以下染色方法。
    1．一步法双染色  先将两种标记抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。
    2．二步法双染色  先用RB200标记的B抗体染色，不必洗去，再用FITC标记的A抗体染色，按间接法进行。
    结果：A抗原阳性荧光呈现绿色荧光，B抗原阳性呈现橘红色荧光。
 
    荧光抗体再染色法
    若切片或其他标本经某种荧光抗体染色后，未获得阳性结果，而又疑有另外的病原体存在时，可用相应的荧光抗体再染色。
有时存档蜡块不能再用来切片，可用存档的HE染色标本褪去盖片和颜色，再作免疫荧光或其他免疫细胞化学的染色。
 
    荧光抗原染色法
    某些抗原可以用荧光素标记，制成荧光抗原，标记荧光素的方法与制备荧光抗体方法相同。用荧光抗原可以直接检查细胞或组织内的相应抗体，特异性较好，敏感性较差。染色方法同荧光抗体染色的直接法。由于多数抗原难以提纯或量少且昂贵，一般很少采用此法。