拉曼问题汇总：拉曼光谱百问解答总结（七）

  七十五.傅立叶变换拉曼光谱与激光拉曼光谱有什么区别?

　　1.基本有以下几点：

　　(1)工作原理不一样;

　　(2)傅立叶拉曼侧重于有机样品分析，用的是，近红外激光器(1064nm)，能量较低信号弱。而色散型拉曼可选不同波长的激光器(200～800nm)，能量高，灵敏度高;

　　(3)使用傅立叶拉曼可减少样品的荧光干扰;

　　(4)傅立叶拉曼价格便宜;

　　(5)现在基本买色散激光拉曼的用户较多。

　　2.傅立叶拉曼测水和黑色阳平效果不好，因为，水和黑色样品对红外光的吸收都比较强，会导致本来就很弱的傅立叶拉曼信号会变的更弱。

　　七十六.激光拉曼光谱技术在生物分析中的应用研究?

　　活细胞拉曼光谱反映药物等分布情况，DNA单分子荧光测试,癌变细胞光谱规律摸索。

　　七十七.为什么荧光会影响Raman谱?

　　1.拉曼测定的是分子受激发后的反射光，因此，对于有些物资如无定型的物质玻璃等会在测定中产生强烈的荧光干扰，将拉曼信号掩盖。

　　现在对于荧光的消除一般是采用更换光源，通过改变激发波长避免荧光在测定的波数范围内出现。

　　2.有时候做拉曼的时候荧光背景较强，就需要改变激发波长来消除荧光影响的。

　　七十八.在激光拉曼光谱仪中，仪器探测器项描述为：瑞利散射抑制O.D.>7。。。不明白其中物理意义?

　　激光激发拉曼后，拉曼光还是很弱(相比较激光和瑞利线)，为了能更好的测量拉曼，需要把激光滤除掉(用滤光片)，一般一个滤光片将激光减弱到十的负七次方，就是叫OD^-7(不好意思，输入法不支持)。

　　例如雷尼绍的拉曼为了将激光减弱的与拉曼水平相当，就用了两个滤光片，所以叫OD^-14。

　　七十九.我将做一个用光谱仪来测量细胞的散射光谱实验，现在，有一台海洋公司的型号是hr4000cg-uv-nir的光谱仪，不知可不可以用来测量细胞的散射光谱。

　　1.建议你使用专门的拉曼光谱仪来测量散射光谱;

　　2.要依据细胞的种类决定;

　　3.细胞可能比较难测量，我没测过，但是可以简单估计一下：

　　①细胞在可见区的荧光会很强，所以用可见过激发效果会不好;

　　②近红外激光应该可以试一试;

　　3.傅立叶拉曼怕水，而细胞应该含有很多水吧，所以恐怕不适合;

　　4.用紫外光激发，恐怕会灼伤细胞。

　　八十.怎样用简单的方法判断拉曼光谱的光路有偏差，除了看信号差以外?

　　信号差是最简单，最明显的。如果是，显微拉曼，那么激光照射样品并上下移动样品台，如果激光光斑一直是个均匀的同心圆并且发散聚拢均匀，那么激光光路就没有问题，反之则不好。

　　信号光路看不到光，调起来复杂，只能根据信号来调。

　　八十一.看到一些文献上当几个峰重合时，用到分峰技术，常用的是计算机去卷积，请问各位大侠，有什么软件或方法可以进行分峰处理?

　　1.在mat-lab中可以进行卷积和去卷积的计算，前提是你得稍微熟悉这些方法;

　　2. origin7.0可以，查一下说明书，按步骤来还是很简单的，没什么去卷积之类的。

　　八十二.比如，说我做了几种矿泉水样品的拉曼谱，发现出现一个未知的峰，我用什么方法知道这是什么物质呢?

　　1.Raman谱峰一般是重复性很好的.你所说的有是产生有时没有的峰，如果，很锐利，应该就是宇宙峰了。

　　宇宙峰就是宇宙射线的影响产生的极其尖锐的峰，应当坚决去掉;好像一般在下午3点到7点的时候会经常出现这种影响，把它处理掉就行了。

　　※宇宙射线，也称高能粒子流，是不经过光路，直接进入CCD的信号，一般仪器周围有强磁场等干扰源的时候会很强烈，别且在下午或傍晚比较强。这些粒子一般只会打到CCD的一个像元上，因此形成的峰会很锐并且不具有高斯或者洛伦茨线形，因此，很容易辨认。

　　2.做一下纯净水样品的测试，如果也在相同位置出现拉曼峰，则可归因于仪器本底或纯水的拉曼;另外，可查一查纯水以及你最怀疑的矿物质的拉曼信息;

　　3.算出吸收谱的能量，查手册。

　　八十三.请问激光拉曼光谱和红外光谱有什么区别?

　　1.象形的解释一下，红外光谱是“凹”，拉曼光谱是“凸”，两者互为补充。

　　2.

　　(1)从本质上面来说，两者都是振动光谱，而且测量的都是基态的激发或者吸收，能量范围都是一样的;

　　(2)拉曼是一个差分光谱，形象的来说，可乐的价钱是1毛钱，你扔进去1毛钱，你就能得到可乐，这是红外;可是如果你扔进去1块钱，会出来一瓶可乐和9毛找的钱，你仍旧可以知道可乐的价钱，这就是拉曼;

　　(3)光谱的选择性法则是不一样的，IR是要求分子的偶极矩发生变化才能测到，而拉曼是分子的极化性(polarizibility)发生变化才能测到;

　　(4)IR很容易测量，而且信号很好，而拉曼的信号很弱;

　　(5)使用的波长范围不一样，IR使用的是红外光，尤其是中红外，好多光学材料不能穿透，限制了使用，而拉曼可选择的波长很多，从可见光到NIR，都可以使用;

　　※当然了还有很多不同的地方，比如，制样方面的，IR有时候相对比较的复杂，耗时间，而且可能会损坏样品，但是拉曼并不存在这些问题。

　　(6)拉曼和红外大多数时候都是互相补充的，就是说，红外强，拉曼弱，反之也是如此!但是，也有一些情况下二者检测的信息是相同的。

　　3.本质上是这样的，红外是吸收光谱，拉曼是散射光谱，偶老板告诉我的，虽然他不是做这个方面的。

　　※红外是当被测分子被一定能量的光照射是，分子振动能级发生跃迁，同时，由于分子的振动能量高于转动能级，那样，振动的同时，肯定含有转动，所以，红外是分子的振转吸收，也就是它将能量吸收。

　　拉曼是当一束光子撞击到被测分子上时，从量子力学上讲，光子与分子发生非弹性碰撞，光子的能量经过碰撞之后增加或者减少，这样，就是拉曼散射;也就是说光子的能量没有完全吸收，当然，也有完全弹性碰撞，那种情况不是拉曼散射，是瑞利散射。从能级的角度来讲拉曼散射，是分子先吸收了光子的能量，从基态跃迁到虚态，到了虚态之后，由于，处于高能级，它从虚态返回到第一振动能级，释放能量，这样放出的光子的能量小于入射光子的能量，这样就是拉曼散射的一种，也就是，处于斯托克斯散射。当，从第一振动能级跃迁到虚态，然后，从虚态返回到基态，这样放出的能量就大于入射光的能量，这就是反斯托克斯区，也是拉曼散射的一种，能量不变的就是锐利散射。

　　4.有些振动红外和拉曼都能检测到，有些振动只有其中一个能检测，比如，氧气、氮气只能用拉曼检测。

　　红外不能检测低于400波数的。红外更适合用于有机物，拉曼更适合无机物。红外受水的干扰比较大。