探究细胞融合时间对融合率的影响

　　在自发或人工诱导下，两个细胞或原生质体融合，使得一个杂种细胞形成，即是细胞融合(cell fusion)。细胞融合使得异核体(heterokaryon)形成、通过细胞有丝分裂异核体进行核融合、Z终使得单核的杂种细胞形成为细胞融合的基本过程。作为一种实验方法，在单克隆抗体的制备，膜蛋白的研究方面，细胞融合应用非常广泛。

　　细胞融合的影响因素

　　一、影响动物细胞融合的因素

　　在动物细胞的融合过程中,细胞融合率不仅会受到促融剂的影响，而且离子强度、离子种类、温度、PH、细胞性质等均会对细胞融合率产生影响。

　　1、细胞融合时,温度和运动状态需要适宜。

　　2、细胞融合过程中,一般会消耗大量的氧气，缺氧时不融合。

　　3、某些细胞融合时需要Ca2+，不然不融合。

　　4、PH为7.4-7.8为Z合适的酸碱度，不在该范围内，不适合融合。

　　5、亲本细胞表面性质对细胞融合率有比较大的影响，如果表面光滑，那么融合比较难，如果表面覆盖绒毛而不规则，那么融合比较容易。

　　6、不同的细胞种类，融合效果也会有所差异。例如淋巴细胞、血细胞几乎不融合，腹水癌融合比较容易。

　　二、影响植物细胞融合的因素

　　植物原生质体融合不存在种属特异性,和其自身种属不相关联，因此，只有外界条件影响融合效率。

　　1、将少量CaCI2加入到融合液中，会对电导率起到一定的维持作用，从而保护细胞。除此之外融合率会受到电脉冲大小、处理时间长短、以及交变电流的强弱的影响。

　　2、在融合前，将原生质用混合盐溶液进行处理，和将伴刀豆蛋白、二甲基亚砜等添加进促融剂中，能够使得融合率提高。

　　3、当电场诱导融合时，原生质体密度会对融合率产生影响。2-8×104个/ml为Z适宜的密度，如果密度大于106个/ml，那么会融合成团；如果密度小于104个/ml，那么会得到较低的融合效率。

　　4、作用时间在PEG诱导融合中起到关键性作用，特别重要的是高Ca2+和PH溶液处理时间长短。如果时间过短，那么不融合；如果时间过长，那么会严重损伤原生质体，大大降低融合效率。

　　5、融合效率也会受到PEG规格和纯度的影响。