·在CELLection™ Dynabeads™ 磁珠的包被过程中,对靶标抗体的数量进行滴定/优化。
·如果目的细胞的数量很低,或细胞表面的靶标抗原浓度很低,则推荐使用间接法技术。
·使用>1 x 10E7个磁珠/mL样品(>25 μL)。
·在使用前对全血样本进行洗涤。
·为了确保获得最高效率的细胞释放效果,绝对不要在溶解冻干DNA酶的过程中涡旋DNA酶溶液。
·在释放细胞的过程中,请将新鲜配制的RPMI/1% FCS预热至37°C。
·确保缓冲液的pH值在7.0-7.4之间以获得理想的DNA酶I活性。更高的pH值会抑制DNA酶的活性。
·RPMI中应含有足量的Mg2+以帮助DNA酶发挥活性。
·当细胞与DNA酶释放缓冲液孵育后,在使用磁力架分离之前对磁珠-细胞混合物进行彻底的吹打非常重要,这样可提供机械力打断DNA连接。未仔细吹打细胞将会降低细胞的得率。