实验材料 肺炎支原体
试剂、试剂盒 糖酵解培养基基础培养基牛血清酵母浸液酚红醋酸铊 青霉素
仪器、耗材 培养皿烧杯玻璃棒天平移液管离心机棉花拭子
实验步骤
一、标本采集
支原体常侵及人和动物的粘膜表面,一般可用棉花拭子涂抹取样后放入2~3 ml支原体液体培养基的小管中,或取其分泌液,若标本是组织块,可在灭菌乳钵或玻璃匀浆后接种,取样后应尽快接种培养。
二、分离培养
转动拭子将标本液体尽量挤出,用无菌滴管吸1~2滴接种在平皿上盖好,用L棒涂抹或倾斜转动平皿使标本均匀分布,置37℃孵育。
三、结果观察
绝大多数支原体为兼性厌氧,少数在含10% CO2和相对湿度80~90%的大气环境中生长良好。支原体生长缓慢,多数于3~4 d长出菌落,少数于1~2 w方长出典型菌落,在平皿固体培养基上生长的菌落呈"油煎蛋"状,边缘不整齐。
其他
一、附录
糖酵解培养基(肺炎支原体培养基)
基础培养基 70 ml
马(或牛血清) 20 ml
25%酵母浸液 10 ml
0.4%酚红 0.5 ml
1%醋酸铊 2.5 ml
青霉素10000 IU/ml 5.0 ml
调pH 7.8
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