发布时间:2020-08-17 11:43 原文链接: 斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验

实验方法原理

实验材料 待测蛋白质样品

试剂、试剂盒 10%三氯醋酸(TCA)考马斯亮蓝凝胶染色液考马斯亮蓝凝胶脱色液

仪器、耗材 Whatman 3 MM 滤纸

实验步骤

1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格;


2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品;


3. 将滤纸凉干,大约需要 15 min;


4. 将滤纸浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重复使用);


5. 用水快速漂洗滤纸;


6. 将滤纸浸入考马斯亮蓝凝胶染液中 30 s(染液可重复使用);


7. 用水快速漂洗滤纸;


8. 在考马斯亮蓝凝胶脱色液中使滤纸脱色,脱色在几分钟之内完成;


9. 通过相应显蓝色的方格,可判断其含有一定量的蛋白质存在。