加少量抗原于硝酸纤维素（NC）膜上，干燥后进行封闭；然后滴加样品血清；洗涤后再滴加酶标二抗，最后滴加能形成不溶有色物的底物溶液（如HRP标志物，常用二氨基联苯胺）；阳性者即可在膜上出现肉眼可见的染色斑点。
优点：灵敏度较普通ELISA高，试剂用量少，操作简单，NC膜可长期保存不影响活性。
