方案11.5超纯水（UPW)的制备和灭菌

有刻度的玻璃硼硅酸盐或消毒的塑料螺口瓶子 螺旋盖 试纸 胶带 标签 纯水设备 消毒锅 日记本

1. 在瓶子上标明日期、容量和批号。

2. 经过过夜循环后的第二天早晨，从纯水器中放出约50 ml水，分别用相应的仪器测定传导率（或电阻）和总有机碳（TOC） 含量，记录在日记本上。

3 . 如果水的质量达到限定的标准（在25°C 时，水的电阻≥ 10 MΩ/cm，TOC≤10 μg/L)，就直接收集至标注好的瓶子内。

4. 灌至一定的体积，例如，如果用于稀释 10 倍浓缩培养基，就分装成 430~450 ml，如果要用于灭菌，就留出 10 % 的空间。

5. 将灭菌指示器放人一个瓶子（消毒之后检査，而后丢弃这个瓶子）。

6 . 用螺口盖将瓶子密封，如果使用碱性玻璃，即有瓶子可能破裂，就将盖子松开。

7. 将瓶子摆放在消毒锅内，放有消毒指示器的瓶子放置在中间。

8. 关上消毒锅，检査设置：121°C ，100 kPa (15 lb/in²)，以后真空之后（postvac deselected）运行20 min。

9 . 开启灭菌程序。

10. 在循环完成之后，检査打印出的记录，确认执行的是正确的灭菌过程，记录在本上。

11. 放置，冷却至 50°C 以下。

12. 打开消毒锅取瓶子，如果在高压灭菌过程中瓶盖松了，就在瓶子的温度降到室温时将盖子拧紧。检查灭菌指示器，确认灭菌条件已经达到，记录在日记本中。

13. 将瓶子于室温短期存放。

14. 根据需要补充至培养室备用，通过检查灭菌指示胶带来确认瓶子是否已经经过灭菌处理。

如果消毒过程中瓶盖被打开了，在瓶子仍然是热的时候将盖子拧上可能会使某些瓶盖内的衬里在瓶子冷却或瓶内容物收缩时落入瓶子。同样， 第一次打开瓶子时， 空气会迅速地进入瓶子， 这会引起污染。因此， 在灭菌过程中被打开的瓶子， 应使其在无菌环境中冷却至室温， 例如在拧盖之前将其保持在消毒锅内或放在层流罩内。