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方案3固定化金属离子亲和介质对磷酸化多肽进行分析

发布时间:2019-03-29 21:59 原文链接: 方案3固定化金属离子亲和介质对磷酸化多肽进行分析

实验材料

牛小肠碱性磷酸酶羧肽酶Y目标磷酸化蛋白TPCK 修饰的膜蛋白酶

试剂、试剂盒

乙酸EDTAFeCl3NH4HCO3MALDI 基质镍-次氨基三乙酸(Ni-NTA)树脂柠檬酸钠

仪器、耗材

致密的反应柱子(CRC)过滤器孵育器MALDI 质谱仪MALDI 靶板微量离心管

实验步骤

一、固定化金属离子亲和柱的制备

二、磷酸化多肽与 IMAC 柱的结合

三、碱性磷酸酶处理亲和结合的磷酸化多肽


四、羧肽酶 Y 消化亲和结合的磷酸化多肽

五、质谱




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