显微科学流式细胞仪的工作原理

  流式细胞术是利用流式细胞仪对处在快速、直线、流动状态中的单细胞单颗粒进行多参数、快速定量分析，同时对特定群体加以分选的现代细胞分析技术。利用高速采集记录系统可观测并记录流式细胞术对单细胞逐个进行高速准备的定量分析和分类，每秒测试数千到万个细胞的整个过程。这种高速信息的测量分析和高纯度分类新技术，为细胞生物学提供了一种强有力的研究手段。

　　1 流式细胞仪的工作原理

　　流式细胞仪用于检测单细胞或微粒的信号，一般是将待测细胞或微粒进行荧光染色后制成悬液标本，在一定气体压力下将待测样品压入流动室，不含细胞或微粒的缓冲液(又称鞘液)在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测细胞或微粒流成一定角度，使鞘液包绕着细胞或微粒高速流动，形成一个圆形的流束(即鞘流)，待测细胞在鞘液的包裹下单行排列，依次通过流式细胞仪的检测区域。激发光源经过聚焦整形后的光束垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下产生激发荧光，同时产生散射光。这两种光信号被在 90°方向的光电倍增管荧光检测器和前向角光电二极管散射光检测器接收，经光电倍增管接收后可转换为电信号，再通过 A/D 转换器，将转换来的电信号转换为数字信号输送给计算机。计算机将各种数字信号进行计算处理后，得到相应的细胞大小、活性、细胞内细胞因子、DNA含量和细胞周期、核糖核酸(RNA)含量、酶和抗原的性质等参数。