普通细菌培养鉴定操作规程

1 检验目的

做疾病的病原学诊断，查找于疾病有关的病原菌以及了解与疾病的关系，指导临床治疗及预后和流行病学的调查。

2 原理

人体很多部位与外界相通，存在栖息菌群，但不致病，当菌群失调或分离到致病菌则具有临床意义；另外机体某些部位是无菌的，如检出则视为致病菌。并排除采样及操作污染。

3 标本要求

（1）标本类型：，骨髓，脑脊液，胸水，腹水，尿液，等；痰液，前列腺液，脓液，组织分泌物或穿刺液等。

（2）标本采集：见标本采集手册

（3）标本储存和运输：室温放置，室温运输并立即送检。人泌尿生殖道标本如白带前列腺液等需临床标本接种于巧克力平板或特殊的运送培养基并置保温设备中送检。

（4）标本拒收状态：非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。

4 容器和添加剂类型

均使用灭菌器皿盛放标本

5 试剂

（1）试剂名称：革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、麦康凯平板、相关试剂等

（2）试剂生产厂家：珠海黑马生物技术有限公司

6设备：

（1）接种针、接种环、酒精灯、

（2）BACT-IST黑马微生物鉴定系统。

（3）、GNP-P270隔水式恒温培养箱、SW-CJ-IF超净工作台、MCO-15A三洋牌二氧化碳培养箱、0414-1台式、FA1004电子天平

7操作步骤

（1）血液、骨髓、脑脊液等标本按照培养目的增菌培养12-18小时后盲目接种或待自动分析仪报警后接种。

（2）接种：以上增菌标本及其他临床标本用接种环取标本接种环划线血平板及其他选择性培养基上,35℃培养过夜，观察结果。

（3）涂片：肉眼见细菌生长，取生长物涂片做革兰氏染色；

（4）纯培养：根据需要接种血平板、巧克力、中国蓝/麦康凯或厌氧平板过夜培养以获得纯培养。

（5）鉴定：按照鉴定仪要求调配菌液浓度，细菌的鉴定见BACT-IST黑马微生物鉴定系统

8生物参考区间

血液，骨髓，脑脊液等无菌部位采取的标本未见细菌生长；其他标本如大便，痰液为正常菌群或未见致病菌。

9患者检验结果的可报告区间

细菌鉴定到种或属；菌群调查报告比例。

10 临床意义：

为医生提供病原学诊断，并为进一步药敏实验提供依据。