1、共价固定法
选择性地利用酶分子表面远离活性位点的特定稀有基团(如巯基) 进行反应，使该基团与载体上另一基团共价交联来固定酶蛋白，使其活性中心朝向溶液方向，以达到控制其空间取向的目的。
2、氨基酸置换法
利用基因定点突变技术在蛋白质分子表面合适位置置换一个氨基酸分子，通过该氨基酸残基特殊的侧链基团控制固定方向。
3、抗体耦联法
大多数抗体具有足够的稳定性承受各种活化与偶联方法。抗体分子中很多可供偶联用的官能团。可以通过赖氨酸的 -氨基或末端氨基、天冬氨酸的 -氨基、谷氨酸的 -氨基或末端羧基进行一般性的偶联。
4、生物素——亲和素亲合法
生物素是存在于所有活细胞内但含量甚微(<0. 0001 %) 的中性小分子辅酶。亲和素是一个含有四个相同亚基的四聚体，每个亚基均含一个生物素结合位点。
5、疏水定向固定法
细胞粘着分子和其他细胞表面分子通常通过疏水作用固定在脂质膜上，磷脂锚定是常选择的方式。接触位点A糖蛋白可通过神经酰胺疏水固定在细胞表面。