发布时间:2022-10-30 12:54 原文链接: 杆状病毒表达系统用于表达单一非融合蛋白的转染质粒

  由于外加的多角体蛋白或其它的氨基酸可能对外源蛋白的生物活性或细胞定位产生影响,所以用于表达非融合型蛋白的转移载体被广泛应用。几种不同的策略被用于设计高水平表达非融合蛋白的转移载体:

  (1)如pAcRP[5]系列等,都在多角体基因启动子启始密码ATG上游引入一个单一的限制性多克隆位点;

  (2)如pAcYM1[6]和pEV55及其衍生物中都含有所有的多角体基因上游非翻译序列(包括启始密码子ATG中的A以及其后跟着的单一限制性克隆位点或多克隆位点),这样就可以避免由于5′端非翻译前导序列的缺失而影响mRNA的稳定性;

  (3)如pVL941、pVL1392、pVL1393[7]等,是将融合载体pAC311多角体基因启动子下游启始密码ATG改变为ATT。这样,插入的外源基因必须含有自身的ATG,并从此开始翻译,而多角体基因启动子驱动的mRNA转录后产物稳定水平不受影响。