杜绝传染病蔓延始于早期诊断——寨卡病毒快速诊断新技术

　　纽约大学牙科学院协同美国Rheonix公司开发了一种利用唾液准确鉴定寨卡病毒感染的新方法，不仅操作方便而且耗时短，极具商业推广价值。

　　这项测试由Rheonix公司的HIV快速检测模型发展而来，成果现已发表在《PLOS ONE》和《Journal of Visualized Experiments》两本杂志。

　　寨卡病毒肆虐全球，如何测试是否感染了寨卡？

　　寨卡随起源于巴西，但是由于人口集中和航空旅行等因素这种传染病的发病频率日益高升，世界卫生组织宣布寨卡引起的出生缺陷问题已经上升至全球公共卫生危机。

　　“寨卡事件使我们意识到，为了减少未来新兴传染病的国际影响我们必须建立有效的监测和诊断程序，”这两篇文章的主要作者、纽约大学牙科学院基础科学和颅面生物学系博后研究员Maite Sabalza博士说。

　　病原体的早期识别是杜绝传染病蔓延的关键。检测过程通常分为两个独立步骤：1、检测病原体的核酸（RNA或DNA）；2、检测抗体，即人体对抗病原体而制造的蛋白质。

　　血液是最常用的、依托于RT-PCR（实时聚合酶链反应）技术的寨卡病毒诊断样本。但是人们感染寨卡病毒后一到两周病毒就会在血液中“消失”，反而在唾液、精液和尿液中的存留时间更长。另外，建议联合采用抗体检测的原因在于，感染病毒后产生的抗体蛋白在体液中的持续时间可达数月至数年。

　　因此，美国国立卫生研究院资助纽约大学的研究人员开发了这款结合核酸和抗体检测于一体，可通过唾液样本快速检测寨卡病毒的新方法（Chemistry and Reagent Device，Rheonix CARD®）。一方面寨卡病毒在唾液中的持续时间大于血液，另一方面唾液采集是非侵入性的，成本效益高，采集过程相对尿液或血液快速简便。

　　最重要的是，现行的RT-PCR检测需要3个小时左右才能出结果，而特异性抗体检测可能需要几个星期，新测试方法从采样到产生结果用时短至仅需几分钟！

　　研究人员另外还采用了其他方法，如耗时20分钟的等温扩增核酸检测，以及利用寨卡特异性抗原进行抗体检测等方法。

　　“越早识别病原体，就能越早采取措施治疗和隔离感染人群，在流行病期间，我们的方法允许机场安检人员在登机前对旅客进行测试，”基础科学教授Daniel Malamud博士说。

　　从HIV到寨卡

　　“当初我们开发HIV核酸序列和特定抗体抗原识别检测时就考虑到以后可以用同样的模式诊断其他传染病，”Malamud说。

　　在《PLOS ONE》文中，研究人员描述了针对寨卡病毒的核酸检测序列，以便使用便携式恒温扩增装置对寨卡的RNA进行重点护理即时检验。在确认了纯化的寨卡RNA和寨卡感染者唾液的检测结果之后，研究人员使用Rheonix CARD®试剂盒和工作站对唾液样本中的病毒含量进行评估（病毒数量与疾病的严重程度和免疫反应息息相关，特别是对孕妇和胎儿）。

　　在《Journal of Visualized Experiments》文中，研究人员使用高密度肽芯片鉴定出了寨卡病毒的特异性抗原。由于寨卡易与登革热、切昆贡亚热等病毒混淆，识别寨卡特异性抗原可以提供更精确的诊断。

　　证据显示，Rheonix CARD®试剂盒可同时自动进行病毒核酸和抗体两种检测。研究人员正在世界各地采集唾液继续进行验证工作。

　　“制定迅速有效的诊断方法和通用标准是我们的努力目标。只要该程序可行，我们就能适应未来新出现或重新出现的任何传染性疾病，”Sabalza说。“除了能非常迅速地确诊传染病病原体，我们的全自动测试平台几乎无需人为动手，对没接受过培训的人来说也很好操作。”