果蝇的三点测交实验

实验方法原理

本实验通过对同一染色体上三个非等位基因的交换行为来验证基因在染色体上呈直线排列。先用野生型果蝇与三隐性果蝇（白眼、小翅、焦刚毛）杂交，制成三因子杂种，再把雌性杂种与三隐性个体测交，在测交后代中由于基因间的交换可得到８种不同的表型，经过数据处理，一次实验便可测出三个连锁基因在染色体上的距离和顺序，绘制出连锁图。

实验材料 黑腹果蝇 ( Drosophila melanogaster ) 品系 : 野生型果蝇 ( + + + ) : 红眼、 长翅、 直刚毛 三隐性果蝇 ( w msn3 ) : 白眼、 小翅、 焦刚毛

试剂、试剂盒 乙醚 玉米粉 琼脂 红糖 酵母粉 丙酸

仪器、耗材 立体解剖镜 恒温培养箱 天平 培养瓶及麻醉瓶 毛笔及白瓷板

实验步骤

1.为了有足够的果蝇用于杂交实验,可在实验进行前2～3d收集野生型和三隐性品系的处女蝇及雄蝇,分开培养。

2.按下列组合进行杂交:

每瓶接入 5 对 , 贴好标签 , 置 25℃培养。

3. 7d 后 , F1 代蛹出现 , 释放亲本。

4. 再过 4～5d 后 , F1 代成蝇开始出现。 观察正、反交两种组合的 F1 表型及性别 , 同时作伴性遗传观察。

5. 从 F1 代中选出若干对 果蝇 ( 正、反交组合不能弄混 ) 分别放到新的培养瓶中继续杂交 , 每瓶 5～10 对。

6. 7d 后 , F2 代蛹出现 , 释放亲本。

7. 再过 4～5d 后 , F2 代 成蝇 逐渐 孵 出 , 可 开 始观 察 统计。 用 双筒 解 剖镜 检 查 眼色、翅形和刚毛形态。 正交组合和反交组合分别统计 , 正交组合只需统计雄性个体。 各类果蝇分别记数。 两天后再检查统计第二批 , 连续检查 8～10d, 即 3～4 次。 在 25℃下 , 自第一批果蝇孵出 10d 内是可靠的 , 再迟时 F3 代可能会出现。 要求每组至少统计 250 只果蝇。一般情况下,F2群体中应有8种表型,其中2种是亲本类型(数量较多),4种是单交换类型,2种数目最少者为双交换类型

8.按下列顺序记录统计数据(反交组合的全部个体与正交组合的雄性个体统计结果合并)