果蝇单因子杂交实验（图）

根据孟德尔的颗粒遗传学理论，基因是一个独立的结构与功能单位．在杂合状态时不发生混淆，完整地从一代传递到下一代．由该基因的显隐性决定其在下一代的性状表现。单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。孟德尔第一定律指出，一对杂合状态的等位基因保持相对的独立性，其自交后代中表型分离比为 3 ： l 。

本实验将观察果蝇单因子杂交后代的表型及其分离情况。

一、实验目的

1、 通过实验深刻理解孟德尔分离定律。

2、 掌握果蝇的杂交技术。

二、实验材料

黑腹果蝇 ( Drosophila melanogaster ) 。

野生型：长翅果蝇 (+/+)

突变型：残翅果蝇 (vg ／ vg)

野生型果蝇的双翅为长翅 (+/+) ，翅长超过尾部。残翅果蜗 (vg ／ vg) 的双翅几乎没有，只留少量残痕，无飞翔能力。

三、仪器设备

立体解剖镜，恒温培养箱，天平，培养瓶及麻醉瓶，毛笔及白瓷板。

四、药品试剂

乙醚，玉米粉，琼脂，红糖，酵母粉，丙酸。

五、实验步骤

1 、交配方式：用纯系残翅果蝇 ( 雌 ) 与长翅果蝇 ( 雄 ) 交配，此为正交实验；反交实验以长翅果蜗为母本、残翅果蝇为父本，由此得 F1 代。 F2 代雌雄个体相互交配， F2 代出现性状分离，如下图所示。

2 、选野生型和残翅果蝇为亲本。雌蝇一定要选处女蜗，可在实验前 2-3 天陆续收集，雌雄个体分开培养．数目多少根据需要而定。

将雌雄果蝇放在一起培养，雌蝇的生殖器中有贮精囊，可保留交配所得的大量精子，雌蝇一次交配所得的精子，足够它多次排出的卵受精，因此在做杂交试验时，雌蝇必须选用处女蝇（没有交配过的雌蝇）。那么如何才能得到处女蝇呢？一般来说，刚羽化出来的果蝇在 12 小时之内是不进行交配的，所以在这段时间内选出的雌蝇即为处女蝇。为了保险起见，可以在羽化后的 8 小时内挑选。因此，在杂交实验开始的一段时间内，各实验小组要根据自己的实验设计，精心挑选处女蝇。为了操作方便，可以在每天晚上 22 ： 00 ～ 23 ： 00 将培养瓶内的成蝇杀死，次日早晨 8 ： 00 ～ 9 ： 00 对新羽化出的果蝇进行挑选。

3、首先把残翅处女蝇倒出麻醉，挑 5 只移到水平放置的杂交瓶中，再把长翅倒出麻醉，挑选 5 只雄蝇，移到上述杂文瓶中。等杂交亲本在杂交瓶中全部苏醒后，将杂交瓶直立，并移入 25 ℃ 温箱中培养。同时，按上述操作进行反交实验接种培养。注意按下述方式贴好标签：

4、7 天后，释放杂交亲本。

5 、再过 4-5 天， Fl 成蝇开始出现，观察 F1 翅膀 ( 表型 ) ，注意显、隐性关系，连续检查 2-3 天，并计数统计，或在释放亲本 7 天后集中观察。

6 、选取正、反交各 5 对 F1 雌雄果蝇，分别移入一新培养瓶 ( 这里不需用选取处女蝇 ) ，置 25 ℃ 温箱小培养。当看到培养瓶内有蛹出现时，及时将亲本处死，以防发生回交。

7 、 7 天后，释放 Fl 亲本。再过 4-5 天， F 2 代成蝇出现后，进行观察统计，可连续统计 7-8 天，观测数目在 200 只以上。被统计过的果蝇倒入水槽冲掉。

注意：无论是对 F 1 还是对 F 2 进行统计，都要及时进行，避免陆续羽化出的果蝇在培养瓶内交尾后将卵产在培养基内。因此要求实验者不断进行观察，只要有新羽化出的果蝇，就要及时取出，并进行统计和观察。