1、材料准备
取蚕豆干种子或洋葱鳞茎,经浸种催芽后,待根长1厘米左右时,吸干水分,将根部用0.1~0.2%秋水仙碱药液浸没,根尖朝下,20℃继续催芽生长,一直浸到根尖明显膨大时,(大约36~48小时),冲洗干净取下根尖0.5厘米部位,经卡诺氏固定液固定0.5~1小时,然后70%酒精保存。
2、解离:
(1)取70%酒精保存的根尖,冲洗后置入1N的盐酸中,室温处理20分钟,将酸冲洗干净备用。
(2)取出经固定的备用根尖,切取具分生组织部分约1~2毫米,(去除根冠和伸长区细胞)置1NHCl中解离10分钟。然后用蒸馏水洗尽材料上盐酸,准备制片和染色
3、染色制片
取一枚经解离的蚕豆根尖,置载玻片正当中,两片载玻片呈十字形对压,然后揭开,在有材料的部位各滴上一小滴丙酸―铁矾苏木精染色,再用盖玻片压片。
4、镜检
观察有丝分裂中期和早后期细胞,并进行染色体计数。 展 |