样品的提取和净化是怎样的

1．提取

农药残留样品提取的原则是根据农药理化性质按相似相溶原理进行。

一般而言，极性较小的农药可以用石油醚、正己烷、环己烷等非极性溶剂或与极性溶剂混合的溶剂提取。极性较强的农药可以用极性溶剂或含水极性溶剂，如丙酮、甲醇等。含水较多的植物样品可以用与水能相混溶的极性溶剂，如丙酮、乙腈等。干样或低含水量的样品可以加少量水润湿，再用适当溶剂提取。含水量高的试样可以先加无水硫酸钠，使水溶性较强的农药释放，再用有机溶剂提取。依极性由强到弱顺序排列的常用溶剂：乙酸、水、乙腈、甲醇、乙醇、异丙醇、丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷、二氯甲烷、正己烷、石油醚。

提取的方法一般有组织捣碎法（大部分动植物样品采用捣碎法提取）、振荡浸取法（样品＋提取溶剂置振荡器上振荡提取）、消化法（用于动物组织样品）、索氏提取法（提取效率高，但提取时间较长）、超声波提取法、超临界提取法（无需有机溶剂，选择性强，无需净化）。

样品的浓缩一般有吹扫法、减压蒸馏法，但要注意不能把溶剂蒸干。

2．净化

当用溶剂提取样品中残留农药时，会带入若干干扰杂质，如色素、脂肪、蜡质等。所以，要进行样品净化。一般的净化方法有：

（1）液—液分配法。利用待测农药与干扰杂质在两种互不相溶的溶剂中溶解度（分配系数）的差异达到分离净化的目的。采用极性溶剂与非极性溶剂配成溶剂对进行液—液分配。如甲醇—二氯甲烷、甲醇—正己烷（石油醚）、甲醇—三氯甲烷等。

（2）吸附柱层析法。在层析柱中用淋洗剂淋洗，达到分离净化的目的。常用的吸附剂有硅镁型吸附剂（如氟罗里硅土，Florisil）、氧化铝、硅胶、活性炭和硅藻土等。

（3）磺化法。利用浓硫酸与样品提取液中的脂肪、蜡质、色素等杂质中所含烯链的磺化作用，生成强极性物质，从而与非极性农药分离。

（4）凝结剂沉淀法。使用凝结剂将杂质沉淀的净化方法。

3．固相萃取（SPE）

固相萃取的基本原理与开放式柱色谱相同。常用的吸附柱填料有氟罗里硅土、氧化铝和硅胶。由于共萃物的极性，因此一般用不同极性的淋洗液淋洗。氟罗里硅土对亲脂性化合物有特别的吸附作用，因此氟罗里硅土特别适于油性样品的净化，用低极性溶剂洗脱氟罗里硅土柱，非极性农药残留的回收率很高，因此氟罗里硅土是常用的填料。氧化铝可以代替氟罗里硅土，特别是分析某些脂肪含量高的样品，氧化铝可分解某些有机磷酸酯，极性共萃物一般不能从中性和酸性氧化铝中洗脱出来，因此可以在某些分析中代替氟罗里硅土。

4．超临界流体萃取（SFE）

超临界流体萃取是近几年出现的一种特殊分离技术。SFE主要使用超临界状态的CO2作萃取剂，兼有气体的渗透能力和液体的分配作用。流出液中的CO2在常压下挥发，待测物用溶剂溶解后进行分析。SFE可以通过调节淋洗液的极性来提高萃取的选择性，以萃取不同物化性质的残留农药。SFE是近几年才发展起来的，很多实验参数和条件还有待进一步优化和明确。萃取液的压力、温度已能很好的控制，但其他一些问题，如细胞组织的萃取、萃取液通过细胞时的速度、滞留时间、样品物质的干扰等还需要进一步的研究。

5．基质固相分散（MSPD）

MSPD是1989年由美国Louisiana州立大学的Barker教授首次提出并给予理论解释的一种崭新的SPE技术。其基本操作是将试样直接与适量反相填料（C18和C14）研磨、混匀制成半固态装柱淋洗。MSPD浓缩了传统的样品前处理中所需的样品匀化、组织细胞裂解、提取、净化等过程，避免了样品均化、转溶、乳化、浓缩等造成的待测物损失。经MSPD柱后的淋洗液可直接通过Florisil柱进一步净化，植物样品中的极性有机物如叶绿素、甘油三酯等被Florisil吸附。最后的流出液可直接进色谱分析。MSPD自1989年提出之后，已在农药残留分析中得到广泛应用，显示了MSPD良好的通用性和发展潜力。MSPD是简单高效的提取净化方法，适用各种分子结构和极性农药残留的提取净化。MSPD首先提高了分析速度，使现场监测成为可能，其次减少了试剂的用量。另外，MSPD更适于自动化分析。