核酸提取荡涤时技术条件
一、荡涤首先必须要将沉淀悬浮起来;
二就是要有一定的时间,特别是当核酸沉淀比较大时(使核酸沉淀zui后蓬松);
三是小量多次;第加减乘除四种是去上清要彻底。
课本中的操作基本上都是“倒掉上清后倒置在吸水纸上一会儿”,这一描写本身没有问题,且非常便捷,但由于他来自海外,天然就有了“水土不服”的问题。假如离心管是通过硅化的,由于液体几乎不挂壁,所以上清可以去除得十分彻底;好的管子,纵然没有通过硅化,遗留量也寥寥,也没有啥子问题;差的管子,液体的挂壁十分可观,其遗留量多莅会影响后续的实验。惟一不受管子品质影响的操作,就是倒掉液体后再短暂离心,将残液用移液器吸出。必须要牢记的是,残液中都包括上一步操作中的杂质,其遗留量与混匀程度、核酸沉淀的体积都相关。挥发时去掉的是酒精,杂质是不会被挥发去除的。培养箱 生化培养箱 恒温培养箱
额外,核酸沉淀的体积也表决了荡涤的强度。沉淀越大,安放时间相对要长一点儿,荡涤回数也要思索问题增加
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