格兰氏染色的详细步骤有哪些,怎样进行格兰氏染色

格兰氏染色的详细步骤有哪些,怎样进行格兰氏染色.

1. 拭淨玻片，滴上一滴无菌水。
2. 以接种环（loop）无菌操作，挑选单一菌落抹于玻片水滴上，均匀涂抹。
3. 于空气中乾燥或玻片烘乾器烘乾，以酒精灯过火热固定后备用。
4. 在玻片涂抹处滴上结晶紫，静置一分钟。
5. 以水轻洗去多馀染液，以吸水纸吸乾玻片。
6. 覆以革兰氏碘液媒染剂，静置一分钟。
7. 以水轻洗去多馀革兰氏碘，液以吸水纸吸乾玻片。。
8. 以95%乙醇冲洗玻片脱色，勿脱色过度（只约需10~20秒），逐滴滴下至发现结晶紫未自涂抹中释出为止。
9. 以蒸馏水轻洗去95%乙醇，以吸水纸吸乾玻片。
10. 以番红複染一分钟。
11. 以水轻洗去番红，以吸水纸吸乾玻片。
12.以吸水纸吸乾或烘乾，并用光学显微镜观察（油镜）。