梯度PCR仪
梯度PCR仪是由普通PCR仪衍生出的带梯度PCR功能的基因扩增仪。PCR反应能否成功,退火温度是关键,梯度PCR仪每个孔的温度可以在指定范围内按照梯度设置,根据结果,一步就可以摸索出zui适反应条件。一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件(通常12种温度梯度)的称之为梯度PCR仪。因为被扩增的不同的DNA,片段其zui适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的zui适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样可节省试验时间、提高实验效率,又节约实验成本。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用。梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。
目前,国内用户比较多的进口品牌主要有伯乐,艾本德,TECHNE等,09前还有一个MJ,不过现在已经被伯乐收购了。国产梯度PCR仪较专业的生产企业有:北京莱普特、北京六一等几家专业的PCR生产企业。
国产梯度PCR仪
PCR仪适用于分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域以聚合酶链式反应(Picymerase Chain Reaction , PCR)为特征的、以检测DNA/RNA为目的的各种病原体检测及基因分析。
梯度PCR仪L9700型除具有上述标准PCR仪功能外,其梯度模块还能同时进行多达12个不同退火温度的PCR反应,在梯度模块上,可实现对梯度温度和梯度宽度等参数的调整,自由编程12道温度,梯度实现不同样品的退火温度并同时进行热循环。仅一次实验就能确定特定体系相应的zui优退火温度。从而可在短时间内对PCR实验进行优化,大大提高PCR科研效率。
实时荧光定量PCR仪原理:
实时荧光定量PCR技术是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。
在常规PCR基础上添加了荧光染料或荧光探针。荧光染料能特异性掺入DNA双链,发出荧光信号,而不掺入双链中的染料分子不发出荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物增加完全。
FUNGLYN 实时荧光定量PCR仪技术创新:
* 采用新型半导体控温技术,控温精度达到0.01℃,保证了扩增反应的精确性;
* 采取光纤导入的方式,激发光源LED和卤钨灯可选,采用侧底部激发的方式,减少了光的边缘效应,zui大限度避免了光信号的衰减,在解决了光强均一性问题的同时,延长了卤素灯的使用寿命。
* 六区独立温度控制,可设置不同的反应条件,避免了热传导过程中的边缘效应,提升了温度控制精度、样品温度均一性等性能。
* 先进的荧光检测系统,新型耐用的卤钨灯,-20℃冷态低温CCD为荧光检测装置,实现真正意义上的“实时、同步”。
* 12列温度梯度功能,可同时运行12个不同的退火温度,在一次实验中即可摸索出zui适宜的退火温度,为用户提供了zui大的便利。
* 多通道检测,zui多可升级到六通道;
* 高分辨率的熔解曲线软件分析功能预留,可根据分析结果调整反应温度,重新设定信号采集点,消除引物二聚体,非特异性扩增等的影响,使得绝大多数扩增反应用SYBR GREEN 1就能够完成,省去了合成探针等的成本;
* 智能化的断电保护功能,意外断电时可自动存储实验结果,开机后可恢复开始实验;
* 内嵌式电脑设计,windows XP系统操作方便;
* 试剂耗材等需求开放,兼容国内外品牌;
* 体积小,噪音低,重量只有18KG,适合任何实验室。
温度控制技术阐述---全球首创的六区控温技术(号: 01274389.5):
1、温度控制是PCR实验中的主要因素,对实验结果产生直接影响。
Funglyn Biotech所有产品均采用“6区独立温度控制”技术,避免了热传导过程中的边缘效应,有效提升了控温精度及孔间温度均一性,从而保障实验结果的可信度。
2、将96孔样品板等分为16(4x4)x 6个模块。每个模块都有自己的温度控制系统,既可以单独设置不同的温度,又可同时进行单一的温度条件实验。
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